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一次性细胞培养瓶是单件无衬垫结构，设计目的是用于封闭系统。当被拧松时，此种瓶盖类型也可被用于开放系统，设计目的（在被拧松时）是用于气体交换的开放系统。当瓶盖被略微拧松时，气体可以在培养瓶的内外环境之间进行交换。细胞培养瓶含有一个0.2微米孔径的隔湿性薄膜封住瓶盖，可以提供持续而无菌的气体交换，是在长期使用的情况下。
一次性细胞培养瓶一般盖子都是封闭的，不带内垫，常用于密闭培养，可保证其密闭性;进口的培养瓶的盖子样式比较多：密闭盖、聚酯盖、透气盖、隔垫盖等。密闭盖的性能和国产的是相同的，聚酯盖常用于开放培养，只需轻轻旋松瓶盖便可保证瓶内气体与环境中气体的交换。细胞培养实验所需的物品、器材应进行严格的灭菌或购买无菌的一次性物品。玻璃瓶可拧松瓶盖灭菌（指高压蒸汽灭菌，以下同）或用铝箔纸包住瓶口，和瓶盖分别灭菌。其它玻璃和金属器材用铝箔纸包裹进行灭菌。
等回实验室后，取出的培养基不要丢弃，收起来可用来培养该细胞。因为才买回的细胞比较脆弱，如果立刻换培养基（就是同一种培养基，两个实验室配的也有差异），可能会影响细胞形态。所以先用他们的培养基把细胞培养着，等有一定的规模再用自己的培养基。
一次性细胞培养瓶的瓶颈也有多种样式，有直颈、斜颈、角度颈、三角形、矩形。
直颈：可以减少培养基因晃动而流到瓶盖里;
斜颈：易于倾注，移液管或者细胞刮容易进入瓶体;
角度颈：移液管或者细胞刮易于进入瓶身，并且可减少培养基因晃动而流到瓶盖;
三角形：移液管或细胞刮更易达到瓶角，宽底增加稳定性;
矩形：斜颈的矩形培养瓶瓶底至瓶颈是一个坡度设计，易于倾注，移液管或者细胞刮容易进入瓶体，大部分斜颈瓶都有一个裙边以增加稳定性。直颈和角度颈的矩形培养瓶整个瓶底都是培养面，节省空间并减少培养基因晃动而流到瓶盖。
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