细胞凋亡是程序性细胞死亡的严格调控形式，可触发细胞自我毁灭而不受任何外部影响。细胞凋亡是生命的重要组成部分，特别是对于必须控制细胞的生长、发育和更新以维持体内平衡的多细胞生物而言。检测细胞凋亡的方法有很多，根据凋亡细胞形态特征，利用光学显微镜、激光扫描共聚焦显微镜和透射电子显微镜等来观察细胞；也可以根据细胞凋亡过程中的时相变化检测是否发生凋亡，常见的有Caspase活性检测、Annexin V检测、线粒体膜电位检测、TUNEL检测等。
 

　　陶术生物能够为广大科研工作者提供细胞凋亡检测服务。我们提供的细胞凋亡检测以Annexin V-FITC/PI双染法为主。在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合，因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素(EGFP、FITC)标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。所以，通过Annexin V和PI双染的方法，就可以把早期凋亡的细胞与晚期凋亡加坏死的细胞区分开来。
 

 

　　实验流程
 

　　1、细胞培养：取对数生长期的细胞，按照合适铺板密度铺细胞；
 

　　2、化合物处理：合适浓度化合物孵育细胞；
 

　　3、细胞染色：Annexin-V和溴化乙锭(PI)避光孵育；
 

　　4、流式分析：流式细胞仪检测。