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两种仪器从检测原理，到检测对象，到仪器构造都不一样。
检测原理：紫外可见分光光度计是利用碘钨灯（UV）和氘灯（visible）作为光源激发样品，采集透过样品的光强，并于透过参比样的光强进行做差对比后，记录样品吸收光强随激发波长变化得到的吸收光谱。
荧光光谱是利用碘钨灯（UV）和氘灯（visible）作为光源激发样品，采集样品被激发后发射出的荧光光强随随激发波长变化得到的发射光谱。
检测对象：紫外可见分光光度计检测的是样品从电子基态被激发到电子激发态的过程。
荧光光谱检测的是样品从电子激发态跃迁回到电子基态的过程。
仪器构造：紫外可见分光光度计采用是双光路构造，激发光源被分束镜分为两束，一路经过待测样品，一路经过参比样。两束光的光经过单色仪分光然后进入检测器测量光强。最后传送到计算机进行数据处理。
荧光光谱采用的是直角单光路构造，激发光源先经过单色仪分光，得到某一特定的波长的光，再透过样品对其激发，在于样品垂直的方向，另一个单色仪将检测样品发出的荧光进行分光后，进入检测器测量光强。最后传送到计算机进行数据处理。
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