分享转染小鼠胚胎成纤维细胞（NIH-3T3）siRNA文章(IF10.588)

转染小鼠胚胎成纤维细胞（NIH-3T3）siRNA文章(IF10.588) 编辑

一、 转染小鼠胚胎成纤维细胞（NIH-3T3），转染siRNA文章概述：

当NIH/3T3细胞生长密度达到60%，在不含FBS培养基的六孔板中进行转染。对于细胞转染使用5μM pGPU6/GFP/Neo-shTRIM11,siALKBH5,miR-21a-5p mimic,miR-590–5p mimic, miR-361–3p mimic, miR-202–3p mimic和相应对照，使用 Advanced DNA/RNA转染试剂(#AD600025 Zeta life, USA) 对细胞转染；在转染24小时后分别对TRIM11或ALKBH5通过蛋白质印?；騫PCR检测敲低效率。

二、其它

1、NIH/3T3细胞培养条件：文章选择Z7181FBS-500胎牛血清培养(# Zeta life, USA)

2、文章作者：河北医科大学公共卫生学院毒理学教研室、河北医科大学环境与健康重点实验室

3、标题：FcγRIIB  The proteasome-dependent degradation of ALKBH5 regulates ECM deposition in PM2.5 exposure-induced pulmonary fibrosis of mice .(IF10.588)

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三、转染转染NIH-3T3细胞原文

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Cell transfection

Transfection was conducted when NIH/3T3 cells grown to 60% density in six-well plates with FBS absent medium. For cell transfection, 5 μM of pGPU6/GFP/Neo-shTRIM11, siALKBH5, miR-21a-5p mimic, miR-590–5p mimic, miR-361–3p mimic, miR-202–3p mimic and cor-responding control (Genepharma, Shanghai, China) was transfected into cells using Advanced DNA/RNA Transfection Reagent (Zeta life, USA) according to the supplier’s guidelines, respectively. TRIM11 or ALKBH5 knockdown efficiency was detected by western blotting or qPCR after 24 h post-transfection, respectively.

四、美国Zeta Life 公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子转染试剂，此技术成为新的蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。

五、文章中所使用转染试剂产品信息

产品名称

Advanced  DNA RNA  转染试剂

货号

AD600025、AD600050、AD600075、AD600150

规格

0.25ML、0.5ML、0.75ML、1.5ML

安培生物科技有限公司是美国 Zeta Life 公司的中国代理商。

安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户，提供*细胞体内可代谢的核酸转染试剂；inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产，包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等，为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务；提供以植物生物为平台基因序列全人源化、*的细胞培养可分解3D基质胶产品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务，努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业。致力成为推动生命科学进步和值得信赖的合作者。