根据结合基团的不同,Ni2+亲和层析柱可分为俩类:Ni-IDA琼脂糖凝胶和Ni-NTA琼脂糖
凝胶。Ni2+有六个螯合价位,其中Ni-IDA螯合了三价,Ni-NTA螯合了四价。所以IDA的载量要比NTA的高,但其弱的结合力使金属离子在洗脱阶段时很容易浸出,与目的蛋白紧密结合,从而导致分离蛋白产量偏低,产品不纯及金属离子污染等问题。而NTA的颗粒粒度均匀,粒径更小,并且螯合镍更稳定,能耐受较高的还原剂,使填料更加稳定,镍离子不易脱落。
如果你追求高产量,而对蛋白纯度的要求并不高,那么可以选用镍IDA-琼脂糖凝胶;如果对蛋白纯度要求高的话,那么镍NTA-琼脂糖凝胶则是*。
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