紫外分光光度计原理是分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息,可用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。根据Lambert-Beer定律:A=εbc(A为吸光度,ε为摩尔吸光系数,为液池厚度,c为溶液浓度)可以对溶液进行定量分析。
紫外分光光度计所用比色皿的分类:
比色皿的制造工艺有两种:一种是粘合剂粘合而成;另一种是高温熔融而成。
比色皿的材料通常来源于石英、熔凝硅石和光学玻璃。
常用比色皿的形状有方形、矩形和圆筒形,容量一般为几毫升。也有用于少量试样的微型或超微型毛细管皿。另外还有高、低温恒温比色皿。
比色皿按照使用的波长范围分:可见光系列(称玻璃比色皿);紫外可见光系列(称石英比色皿);红外光系列(称红外石英比色皿)。
紫外分光光度计所用比色皿的选用:
紫外光度实验中的比色皿通常使用玻璃比色皿和石英比色皿,玻璃比色皿是用光学玻璃制成的比色皿,只能用于可见光区,适用于330-1000nm波长范围,石英比色皿是用熔融石英(氧化硅)制成的比色皿,既适用于紫外光区,也可用于可见光区,适用于200-400nm波长范围。
利用石英和玻璃比色皿在紫外光区和可见光区有无吸收的差异,在紫外光区时,由于玻璃比色皿强烈吸收紫外光,对实验数据和结果有影响,石英比色皿不吸收紫外光,不会影响数据,因此在紫外光区不使用玻璃比色皿而使用石英比色皿。而在可见光区,玻璃的影响非常小,可忽略,和石英比色皿一样均可以使用,但考虑到节约经济的因素,由于玻璃比色皿的价格远远低于石英比色皿,通常选择可见光区使用玻璃比色皿,紫外光区使用石英比色皿。
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