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我司详述如何把ATCC细胞养的更漂亮!

来源:上海通蔚实业有限公司   2020年10月22日 08:53  

一、不同的ATCC细胞,喜欢的环境是不一样的。

这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是ATCC细胞生长的空间密度问题,有一些ATCC细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的ATCC细胞。譬如内皮ATCC细胞。而有一些是ATCC细胞是数量少一点ATCC细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬ATCC细胞和某些肿瘤ATCC细胞。

尤其是巨噬ATCC细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的ATCC细胞,这样ATCC细胞状态会比较好。并且巨噬ATCC细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,ATCC细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养ATCC细胞的时候应该摸索该ATCC细胞喜欢的生长空间密度问题。

 

二、对于有些人总是会遇到养的ATCC细胞形态怎么都不好的问题。

这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁ATCC细胞,如果ATCC细胞形态不好,(或者ATCC细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:

首先:倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬ATCC细胞我们只吹打,不消化的)

其次:把吹打下来的ATCC细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察ATCC细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分ATCC细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入*培养基培养。后续观察ATCC细胞生长情况以及形态。

如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到ATCC细胞形态。其中要注意,结合ATCC细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的ATCC细胞你就等贴壁ATCC细胞比较多点的时候再传。反之亦然。

 

三、ATCC细胞关于培养瓶内加入培养基的量的问题。

这个是要靠自己去摸索你所养的ATCC细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些ATCC细胞反而是培养基少一点相反ATCC细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。)对于生长速度快的ATCC细胞,易生长的ATCC细胞加少一点培养基ATCC细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。

 

四、关于选择培养瓶的问题。

有时发现生长速度快的ATCC细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性塑料瓶相对好一些。而对于同一种ATCC细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比塑料瓶内好。

这可能是因为塑料瓶比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的ATCC细胞在塑料瓶这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。

所以对于生长速度慢的ATCC细胞如果想要更漂亮的ATCC细胞状态,塑料瓶比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的ATCC细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种ATCC细胞,在其生长速度慢的时候,塑料瓶会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,ATCC细胞玻璃瓶则相对会好一点。

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