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ELISA试剂盒实验步骤解析:
A、加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔,空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,给酶标板覆膜,37℃孵育2小时,为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
B、弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。
C、弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
D、每孔加工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。
E、弃去孔内液体,甩干洗板5次,方法同步骤C。
F、每孔加底物溶液100μl,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟,当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
G、每孔加终止液50μl,终止反应,此时蓝色立转,终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
H、立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值),应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
ELISA试剂盒专注科研试剂盒的研发及销售多年,涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域,满足您实验所需,以实现与客户的双赢,完善的库存及供应体系以及稳定的纯化技术,保证产品均能现货供应。期待您的来电。
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