一、定義與技術(shù)原理

動(dòng)物體外受精（IVF） 指在人工模擬的體內(nèi)環(huán)境中，使哺乳動(dòng)物的精子和卵子完成受精過程的技術(shù)。受精后形成的胚胎可移植至受體子宮發(fā)育，所得后代稱“試管動(dòng)物"（test-tube animal）。
核心生物學(xué)原理：

1. 精子獲能（Capacitation）：

• 精子需去除表面“去能因子"（如糖蛋白），通過添加肝素、鈣離子或血清白蛋白誘導(dǎo)獲能，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力與穿透卵子能力。

• 獲能過程依賴物種特異性條件（小鼠需30分鐘，豬需2–3小時(shí)）。

2. 卵母細(xì)胞成熟（Oocyte Maturation）：

• 體內(nèi)成熟卵子可直接使用；未成熟卵子需體外培養(yǎng)至MII期（第二次減數(shù)分裂中期）。

3. 受精兼容性：人工環(huán)境需模擬輸卵管生理?xiàng)l件（溫度、pH、滲透壓、營養(yǎng)）以支持精卵結(jié)合。

二、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程

1. 卵母細(xì)胞采集與處理

2. 精子采集與獲能

• 采集：附睪穿刺或精液收集。

• 獲能處理：

• 化學(xué)法：添加肝素（牛）、鈣離子載體（小鼠）。

• 生物法：與含卵丘細(xì)胞的卵泡液共培養(yǎng)。

3. 體外受精

4. 胚胎培養(yǎng)與評(píng)估

• 培養(yǎng)基：KSOM+AA（小鼠）、SOF（牛）、TALP系列（跨物種）。

• 發(fā)育監(jiān)測(cè)：形態(tài)學(xué)分級(jí)。

5. 胚胎移植或冷凍

• 移植：同步受體發(fā)情周期，手術(shù)/非手術(shù)法植入子宮。

• 冷凍保存：液氮（-196℃）長期儲(chǔ)存遺傳資源。