通过茜素红染色检测细胞成骨分化

实验原理

1、成骨诱导的过程是使钙离子能够以钙盐的方式沉淀下来，“钙结节”，鉴定钙结节的染色方法常用茜素红染色法。
2、茜素红：茜素磺酸钠，茜素S，茜素红S，茜素胭脂红，1,2-二羟基蒽醌-3-磺酸钠，1,2-二羟基蒽醌3-磺酸钠盐。橙黄色或黄棕色粉末。易溶于水，微溶于乙醇，不溶于苯。1%水溶液pH为2.15，其水溶液呈前黄褐色，加盐酸后变为黄色，加氢氧化钠后则变成蓝紫色。有刺激性。能与许多金属离子生成有色化合物，能与锆、钍、铝、钛及钙发生显色反应。

茜素红染色实验步骤：

1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯I20分钟，二甲苯Ⅱ20分钟，无水乙醇I5分钟，无水乙醇Ⅱ5分钟，75%酒精5分钟，自来水洗。

2、茜素红染色：切片用茜素红染液染5-10分钟，自来水洗，将切片放置烤箱内烤干。

3、透明封片：切片入干净的二甲苯透明5分钟，中性树胶封片。

4、显微镜镜检，图像采集分析。

结果判读：钙盐沉积出呈深红色，背景淡红色或者近无色。