人磷脂爬行酶1试剂盒

迷人的实验，放心的选择

我司人磷脂爬行酶1试剂盒胞近3000种，来源于美国ATCC,细胞都是经过严格质量控制，在中国大陆努力搭建正牌细胞与国内广大科研人员之间的沟通桥梁，还有更多相关实验产品，标准品，细胞株和实验技术服务等等前期后续服务。

　　Q1. 液体培养基的保存是冷藏好？还是冷冻好？

　　要冷藏！！因为液体培养基经冷冻后再经溶化时，其溶液的pH值会发生改变，溶液往往变碱，某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中，通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。

　　Q3.细胞计数及存活测试
1、原理：
(1)计算细胞数目可用血球计数盘或是Coultercounter粒子计数器自动计数。
(2)血球计数盘一般有二个chambers，每个chamber中细刻9个1mm2大正方形，其中4个角落之正方形再细刻16个小格，深度均为0.1mm。当chamber上方盖上盖玻片后，每个大正方形之体积为1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用时，计数每个大正方形内之细胞数目，乘以稀释倍数，再乘以104，即为每ml中之细胞数目。
(3)存活测试之步骤为dyeexclusion，利用染料会渗入死细胞中而呈色，而活细胞因细胞膜完整，染料无法渗入而不会呈色。一般使用蓝色之trypan blue染料，如果细胞不易吸收trypan blue，则用红色之Erythrosin bluish。计算细胞活率：活细胞数/(活细胞数+死细胞数)×100%。计数应在台盼兰染色后数分钟内完成，随时间延长，部分活细胞也开始摄取染料;因为台盼兰对蛋白质有很强的亲和力，用不含血清的稀释液，可以使染色计数更为准确。

　　Q4.细胞特性
在细胞培养之前，我们要了解一下你所要养细胞的基本特性，这点可以从细胞的产品说明书或者从ATCC细胞库查询。除此之外我们还要知道每管细胞的数量，建议分裂或传代的比例，和已知细胞的传代代次等信息。

　　Q5.准备培养基
复苏细胞时需要准备合适的培养基，血清和细胞生长所需的添加剂。大部分培养细胞所用的培养体系，可以在订购细胞系时获得。
虽然大多数细胞系可以在不止一种培养基中生长，但是当培养基改变时，细胞的性质也会变化。因此，使用细胞库推荐的培养基来培养细胞会获得的效果。

　　Q6.开启冻存管
1.准备一个培养瓶，加入适宜细胞培养的培养基，液体体积按照说明书的推荐配置，并平衡培养基的温度和pH（CO2）?！?br/>2.在37℃水浴中或细胞的正常生长温度下将冻存管轻轻摇动。解冻要快，约2分钟或直到冰晶融化即可。
3.从水浴中取出冻存管并用浸泡或喷洒70%乙醇的方式来消毒。进一步的操作均需在无菌操作台中严格无菌条件下进行。
4.拧开冻存管的管帽并将内容物转移到一个含有9 ml推荐培养基的无菌离心管中。通过温和离心（125×g 10 min）除去冷冻?；ぜ粒―MSO）。弃去上清，并用1或2 ml*培养基重悬细胞。将这些细胞悬液转移到含有*培养基的培养瓶中并轻轻摇动以*混匀。
5.培养24小时后检查细胞状态并在需要时进行传代。

　　Q7. 培养用液pH对细胞生长的影响

　　由于，大多数细胞适宜pH为7.2~7.4，偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不*相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。

　　但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些，偏酸环境中更利于细胞生长。因此，我们在配制培养用液时，可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时，溶液的pH还会向上浮动0.2左右。