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上海棱光技術(shù)有限公司

熒光分光光度計(jì)的構(gòu)成示意圖你們都會(huì)嗎?

時(shí)間:2020-12-22 閱讀:13384
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  熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。通過對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化, 從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
 

  熒光計(jì)結(jié)構(gòu)示意圖
  一、激發(fā)光源
  對(duì)激發(fā)光源主要考慮其穩(wěn)定性和強(qiáng)度,因?yàn)楣庠吹姆€(wěn)定性直接影響測(cè)量的重復(fù)性和準(zhǔn)確度,而光源的強(qiáng)度又直接影響測(cè)定的靈敏度。熒光測(cè)量中常用的光源包括高壓汞燈或氙燈。氙燈產(chǎn)生強(qiáng)烈的連續(xù)輻射,其波長(zhǎng)范圍在250~700nm;高壓汞燈發(fā)射365 nm、405 nm、436 nm、546 nm、579 nm、690nm和734 nm的線狀譜線,測(cè)量中常用365 nm、405 nm、436 nm三條譜線。目前大部分熒光分光光度計(jì)都采用150W和500W的氙燈作光源;現(xiàn)代熒光儀器有采用12 V50W的新型溴鎢燈作光源,在300~700nm波段發(fā)射連續(xù)光譜。此外,20世紀(jì)70年代開始用激光作為激發(fā)光源,激光光源單色性好、光強(qiáng)度大、脈沖激光的光照時(shí)間短,可以避免某些感光物質(zhì)的分解。
  二、單色器
  熒光分析儀器有兩個(gè)單色器,激發(fā)單色器和熒光單色器)。單色器的作用是將不需要的光除去,使需要的激發(fā)光透過而照射到樣品池,第二個(gè)濾光片將由激發(fā)光所發(fā)生的反射光、瑞利散射光、拉曼散射光和由溶液中雜質(zhì)所發(fā)生大多數(shù)的熒光濾去。濾光片熒光計(jì)采用濾光片做單色器,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,價(jià)格便宜,用于已知組分樣品的定量分析,不能提供激發(fā)光譜或熒光光譜。熒光分光光度計(jì)都采用光柵分光,可以獲得單色性好的激發(fā)光,并能分出某一波長(zhǎng)的熒光,以減少干擾,而且可以掃描激發(fā)光譜或熒光光譜。
  三、樣品池
  熒光分析用的樣品池須用低熒光材料制成,通常用石英,四面均透光。形狀有正方形、長(zhǎng)方形或圓形,但常用正方形樣品池,因其散射干擾較少。
  四、檢測(cè)器
  熒光分光光度計(jì)中的檢測(cè)器有較高的靈敏度,一般用光電倍增管(PMT)做檢測(cè)器。為了消除激發(fā)光對(duì)熒光測(cè)量的干擾,在儀器中,檢測(cè)光路與激發(fā)光路是相互垂直的。

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