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如何平衡色譜柱?

時間:2007/1/31閱讀:7053
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平衡過程中,將流速緩慢地提高 
       用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對試劑度如果較低,則需要較長的時間來平衡)

         色譜柱的再生   進(jìn)行色譜柱再生時,應(yīng)使用一個謙價的泵,我們建議不使用您的液相色譜儀上的泵。 
     表1 建議用來沖洗的溶劑體積
     色譜柱尺寸 柱體積 所用溶劑的體積 
      125-4 1.6ml 30ml

    250-4 3.2ml 60ml

   250-10 -20ml 400ml


     請根據(jù)下表選擇您的再生方法:


     極性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色譜填料)的再生:


     正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**


     非極性固定相(如反相色譜填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:


     水→乙腈→氯仿(或異丙醇)→乙腈→水

    0.05M稀硫酸可以用來清洗已污染的色譜柱 

  注意:


     在對NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時,由于NH2可能成銨根離子的形式存在,因此應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再用水沖洗至堿溶液*流出。


     **如果簡單的有機(jī)溶劑/水的處理不能夠*洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì),用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。


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