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3420-2APT-2-ELISpot Pro: Human IFN?γ (ALP)人干擾素檢測
  • 3420-2APT-2-ELISpot Pro: Human IFN?γ (ALP)人干擾素檢測

貨物所在地:重慶重慶市

更新時間:2025-06-09 11:28:36

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ELISpot Pro: Human IFN?γ (ALP)人干擾素檢測 MABTECH
ELISPOT全名為酶聯(lián)免疫斑點檢測,結(jié)合了細胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù),能夠檢測到單個細胞分泌的細胞因子情況。簡單來說,就是用包被好的抗體捕獲培養(yǎng)中的細胞分泌的細胞因子,并以酶聯(lián)斑點顯色的方式將其呈現(xiàn)出來。

ELISpot Pro: Human IFN?γ (ALP)人干擾素檢測

MABTECH ELISPOT 實驗原理

ELISPOT 實驗使用 PVDF 膜為底的 96 孔板(cat:MSIPS 4510,Millipore),包被上特異性單克隆抗體(需要無毒,不含內(nèi)毒素,親和力高的抗體),以捕獲細胞分泌的細胞因子。

然后在培養(yǎng)板的孔內(nèi)加入待檢測的細胞和抗原刺激物進行培養(yǎng)。在刺激物的刺激下,T 細胞就會在對應(yīng)的時間段分泌對應(yīng)的細胞因子。此時細胞因子就被包被在膜上的抗體所捕獲。

洗去細胞后,被捕獲的細胞因子可以與biotin標記的第二抗體結(jié)合,然后用酶標親和素與biotin結(jié)合,進行化學(xué)酶聯(lián)顯色,就可以在膜的局部形成一個個圓形的斑點(當然,也可以使用熒光素標記的第二抗體,這樣就省去了后續(xù)的化學(xué)顯色方法,并且一次可以檢測多種細胞因子),每一個斑點就對應(yīng)了當初一個分泌細胞因子的細胞。

統(tǒng)計膜上的斑點的數(shù)目,再除以當初加入孔內(nèi)的細胞總數(shù),就可以計算出陽性細胞的百分比。

MABTECH該技術(shù)有以下三大優(yōu)點:

一:靈敏度高。一百萬個細胞中只要有一個細胞分泌細胞因子就可被檢測出來,相對于傳統(tǒng)的 ELISA 方法提升了 2~3 個數(shù)量級。

二:單細胞水平,活細胞功能檢測。ELISPOT 是用抗原直接刺激活細胞,檢測的是活細胞的功能。

三:操作簡便經(jīng)濟,可進行高通量篩選。ELISPOT 沒有復(fù)雜的細胞體外擴增過程,不使用同位素,按照標準化的實驗操作,一個實驗者可以同時處理數(shù)百個樣品,效率遠遠高于其它檢測方法。

ELISpot Pro: Human IFN?γ (ALP)人干擾素檢測

MABTECH :3420-2APT-2包括:

Pre-coated plates, mAb 1-D1K(2 clear plates) Detection mAb: 7-B6-1, ALP (150 μl)

BCIP/NBT-plus substrate(25 ml)

Positive control: Anti-CD3 mAb (CD3-2) (100 μl)


?


The kit is intended for enumeration of cells secreting human IFN-y using the ELISpot assay.
ComponentsConcentrationAmount
Capture mAb 1-D1K1 mg/ml600 μ
Detection mAb 7-B6-1,biotin1 mg/ml50 μl
Streptavidin-ALP50μl



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