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菌种名称：生孢梭菌

英文名称：Clostridium sporogenes

培养基 特殊蛋白胨：23.0，可溶性淀粉：1.0，氯化钠：5.0，琼脂：10.0，脱纤维羊血：5%(50℃添加)，pH：7.3±0.2（25℃） 

生长条件 37℃；18-24h；厌氧 

生长特性 G+，细胞直杆状，0.73×1.46~3.33μm。多为单个排列。芽胞椭圆形，次端生，孢囊膨大。芽胞形成后菌体迅速分解，只剩下芽胞。 

存储条件 2-8℃ 

安全等级 2 

形态 菌落直径为0.5-1mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面灰白色，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地湿润，易挑起，G＋（蓝紫色），杆菌，纯度：纯 

模式菌株 no 

操作步骤 ①准备上述平板2块和无菌水（提前置于厌氧环境平衡24h）；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL无菌水，打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入2块平板，200μL/个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。 

活化步骤：

冻干粉首-次活化，将菌粉甩至底部，将尖头一侧用酒精消毒后敲开，取 0.2-0.3ml 溶解液加入至菌种管中，轻轻弹至菌粉混合均匀，用无菌吸头全部吸出溶解液，全部接种至  2  支斜面上培养。注意真空菌种管一旦敲开里面的冻干粉就必须全部被用掉，留着也没用。如果有不明白之处，应先与我 中心联系，避免不必要的损失。

注意事项：

1.微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

2.生孢梭菌操作在无菌条件下进行，接种完毕应该灭菌再做丢弃处理；

3.斜面菌种和穿刺菌种保存时间通常为 3-6 个月，应根据菌种状况及时结转；冻干粉保存时间通常是 2-25 年；甘油菌保存时间为 2-5 年。