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產(chǎn)品簡介：

本產(chǎn)品是用于MDA（Multiplex Displacement Amplification）技術(shù)的全基因組DNA擴增試劑盒，它利用隨機引物結(jié)合在全基因組（變性后）的不同位 置，然后利用具有超長DNA合成能力的phi29 DNA聚合酶，進行鏈取代合成。MDA擴增DNA的示意圖如下：

產(chǎn)品特點：

1.基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超-強鏈取代能力，故所得擴增DNA突變率比PCR低至少10倍。

2.可以將基因組DNA擴增上萬倍，非常適用于痕量珍貴樣品。

3.可使用各種來源的樣品，尤其是痕量法醫(yī)樣品，包括全血，干血，發(fā)根，口腔粘膜刮液培養(yǎng)細胞，真菌和病毒等。

4.操作簡便快捷，恒溫（30℃）反應(yīng)，無須貴重PCR儀即可實現(xiàn)擴增。

5.含有熒光染料，故可以實時檢測擴增效果，不需要反應(yīng)結(jié)束后電泳檢測，避免浪費寶貴的擴增產(chǎn)物。

6.產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗，包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構(gòu)建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析（片段差異， 微衛(wèi)星差異，SNP，STR）等。

7.本產(chǎn)品足夠30次20 ?L體系的全基因組擴增。

8.實時全基因組擴增試劑盒（MDA 熒光染料法）只能用于科研，且只適用于擴增純化好的基因組DNA。

產(chǎn)品參數(shù)：

成分 規(guī)格包裝

溶液A 30 μL0.5 mL 藍色蓋

MDA 專用隨機引物溶液 60 μL0.5 mL 棕色管

20×飽和染料30 μL0.5 mL 棕色管

10×DNA 環(huán)化-擴增緩沖液 60 μL0.5 mL 綠色蓋

dNTP（25 mM） 30 μL0.5 mL 白色蓋

DNA 環(huán)化酶A 15 μL0.5 mL 紫色蓋

DNA 環(huán)化酶B 15 μL0.5 mL 紫色蓋

Phi 29 DNA 聚合酶

（10 U/μL） 15 μL0.5 mL 紅色蓋

使用手冊 1 份無

運輸及保存

低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

純化好的基因組 DNA

使用方法：

1如果有 N 個 DNA 模板，則標(biāo)記 2N 個PCR 管，多出的一組為不加模板的陰性對照管。

2設(shè)置 20 μL 的擴增反應(yīng)

330℃保溫 12 小時。最好使用PCR 儀進行 30℃保溫（注意：不是 37℃）并打開熱蓋保溫。每 10 分鐘設(shè)置成一個循環(huán)，采集一次 SYBR 通道的熒光信號。由于是可以實時檢測反應(yīng)，所以反應(yīng)不一定要在設(shè)置時間到達后結(jié)束，可以在擴增曲線進入平臺期后（已經(jīng)沒有新的 DNA 合成）結(jié)束。

465℃保溫 10 分鐘使phi29 DNA 聚合酶滅活。注：由于 phi29 DNA 聚合酶有 DNA 外切活性，所以最好將其滅活以免干擾后續(xù)反應(yīng)。

5典型實驗結(jié)果。有擴增的樣本將有平緩的 S 熒光曲線，無模板對照將沒有此標(biāo)準(zhǔn)擴增曲線或擴增曲線。

6若采用 30℃金屬浴或水浴，必須在樣品管中加入 50 μL 石蠟油以防水分蒸發(fā)，使用電泳檢測或 PCR 檢測是否有擴增。

7擴增所得 DNA 可以用于后續(xù)實驗。

選擇我們的實時全基因組擴增試劑盒（MDA 熒光染料法），就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！