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產(chǎn)品簡介：

白色念珠菌（Candidaalbicans），是一種真菌，通常存在于正常人口腔，上呼吸道，腸道及陰道，一般在正常機體中數(shù)量少，不引起疾病，當(dāng)機體免疫功能或一般防御力下降或正常菌群相互制約作用失調(diào)，則本菌大量繁殖并改變生長形式（芽生菌絲相）侵入細胞引起疾病。因此對其進行分子生物學(xué)研究具有重要意義。但其 RNA 的提取不是非常容易，所以本公司專門開發(fā)了專門用于白色鏈珠菌總 RNA 快速提取的本試劑盒。

產(chǎn)品特點：

1.操作更加簡單快速，整個過程只需要不到十分鐘（對一個樣品而言）。

2.RNA 純度更高，OD260/OD280 一般在 2.0 左右。

3.一般不含用 RT-PCR 可以檢測到的基因組 DNA 污染。

4.RNA 產(chǎn)率高，一般在 20-70?g/mL 白色念珠菌培養(yǎng)物(約 2.0×10E 個細胞)。

5.得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR、Northern 雜交、cDNA 合成等實驗。

6.可以進行無氯仿操作，只是純度稍微降低，但不影響使用。

7.本產(chǎn)品足夠 50 次微量提取。

8.白色念球菌RNA純化試劑盒（過柱法）只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

規(guī)格及成分

保存和運輸

常溫運輸和保存，有效期一年。

自備試劑

氯仿，RNase-free 收集管，液氮，球磨儀，超聲破碎儀。

使用方法：

1.將 50mg 左右濕重的樣品(或 100 mg 左右的菌落)轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 塑料離心管中。如果是液體真菌培養(yǎng)物，則直接將 1-10 mL 液體真菌在 1.5 mL 塑料離心管中 15000g 離心 1 分鐘，并棄盡液體培養(yǎng)基（可以分多次離心）。

2.將真菌沉淀在液氮中冷凝成固體，再轉(zhuǎn)移到一個干凈的研缽中，在液氮中研磨成粉。再把粉轉(zhuǎn)移到到離心管中。最后加入 65℃預(yù)熱的 0.4 mL 白色念球菌 RNA 純化溶液 A。

3.也可以采用球磨破碎儀或超聲破碎儀在 0.4mL 白色念球菌 RNA 純化溶液 A 中破碎細胞。

4.加入 0.4 mL 白色念球菌 RNA 純化溶液 B，劇烈振蕩 30 秒。

5.65℃保溫 5 分鐘。

6.室溫 15000g 離心 3 分鐘，轉(zhuǎn)移上清到一干凈的 1.5mL 塑料離心管中。

7.再加入 0.1 mL 白色念球菌 RNA 純化溶液 B 和 0.1mL 自備氯仿。此步可以不加氯仿，但純度稍低。

8.渦旋振蕩混勻 30 秒。

9.室溫 15000g 離心 3 分鐘，轉(zhuǎn)移上清到一自備的、干凈的 5mL 塑料離心管中。注意：1.5mL 的離心管裝不了后續(xù)要加的溶液。

10.加入 1.5 mL 的白色念球菌 RNA 純化溶液 C（約 1.2-1.5 mL）和 0.5 mL 的白色念球菌 RNA 純化溶液 D，充分顛倒混勻。

11.將 0.7 mL 混合液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，15000g 室溫離心半分鐘，棄收集管中的穿透液。重復(fù)此操作直到將所有混合液掛柱。

12.加入 0.5 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，室溫離心半分鐘，棄收集管中的穿透液。

13.重復(fù)上步洗滌一次。

14.室溫離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的通用洗柱液會影響 RNA 的使用。

15.將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一自備的 RNase-free 1.5mL 塑料離心管中，加入 30-100?L RNA 洗脫液。

16.室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為 RNA 樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

選擇我們的白色念球菌RNA純化試劑盒（過柱法），就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！