目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>試劑盒>> 染料法實(shí)時(shí) RCA 試劑盒
| 參考價(jià) | ￥ 2490 |
| 訂貨量 | ≥1盒 |
| ￥2490 |
| ≥1盒 |
更新時(shí)間：2025-05-19 15:04:46瀏覽次數(shù)：90評(píng)價(jià)
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | XY-D-1579 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 英文名稱(chēng) | SYBR Realtime RCA Kit |
| 保存條件 | -20℃ | 有效期 | 12個(gè)月 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
RCA（Rolling Circle Amplification，滾環(huán)擴(kuò)增）是利用 phi29 DNA 聚合酶的超長(zhǎng)合成能力，在一定條件下（如隨機(jī)引物、dNTP、Mg 離子存在時(shí)）能夠以線(xiàn)狀的超長(zhǎng)基因組DNA 或環(huán)化后的短DNA 為模板進(jìn)行全基因組擴(kuò)增的技術(shù)。本產(chǎn)品是基于 RCA 技術(shù)，針對(duì)環(huán)狀 DNA 為模板專(zhuān)門(mén)開(kāi)發(fā)的 RCA 試劑盒。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.即開(kāi)即用，十分簡(jiǎn)單方便，用戶(hù)不需要辛苦摸索條件。
2.直接使用純化的環(huán)狀單鏈DNA 或環(huán)狀雙鏈 DNA 為模板。如果樣本為線(xiàn)狀 DNA， 需要預(yù)先對(duì)其進(jìn)行環(huán)化（本公司有單鏈 DNA 環(huán)化和雙鏈 DNA 環(huán)化試劑盒）。
3.RCA 屬于恒溫?cái)U(kuò)增，操作簡(jiǎn)單，但如果要實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，需要熒光定量 PCR 儀器。如果沒(méi)有，也可以電泳檢測(cè)或PCR 檢測(cè)擴(kuò)增效果。
4.含熒光染料，可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè) RCA 反應(yīng)過(guò)程，不需要跑電泳檢測(cè)，節(jié)約寶貴樣品（因?yàn)檫M(jìn)行 RCA 擴(kuò)增的樣品都非常珍貴）。
5.實(shí)時(shí)檢測(cè)使得反應(yīng)可以在平臺(tái)期后就可以結(jié)束，避免 phi29 DNA 聚合酶具有的強(qiáng) 3-5 外切酶活性降解已經(jīng)合成的 DNA。
6.phi29 DNA 聚合酶具有的強(qiáng) 3-5 外切酶活性，故擴(kuò)增具有高保真性。
7.可以將模板 DNA 在幾個(gè)小時(shí)到十幾小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增萬(wàn)倍左右。
8.本產(chǎn)品足夠 50 次 10 ?L 體系的熒光染料實(shí)時(shí) RCA 反應(yīng)。
9.得到的 DNA 可以直接用于測(cè)序、酶切或 PCR 等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。染料法實(shí)時(shí) RCA 試劑盒只能用于科研。
產(chǎn)品參數(shù)：
規(guī)格及成分
| 成分 | 規(guī)格 | 包裝 |
| 4×染料法實(shí)時(shí)RCA Mix（無(wú)酶無(wú)引物） | 125ul | 0.5 mL 綠蓋管 |
| RCA 專(zhuān)用隨機(jī)引物溶液 | 100ul | 0.5 mL 白蓋管 |
| phi29 DNA 聚合酶，10 U/μL | 25ul | 0.5 mL 紅蓋管 |
| 使用手冊(cè) | 1份 | 無(wú) |
保存和運(yùn)輸
低溫運(yùn)輸，-20℃保存,有效期為一年。
自備試劑
環(huán)狀單鏈 DNA 模板或環(huán)狀雙鏈 DNA 模板、超純水。
使用方法：
1.按下表設(shè)置 10 uL 的環(huán)狀DNA RCA 反應(yīng)：
2.放熒光定量 PCR 儀器上，設(shè)置 30℃保溫 16 小時(shí)，每 10 分鐘設(shè)置成一個(gè)循環(huán)， 采集一次 SYBR 通道的熒光信號(hào)。由于是可以實(shí)時(shí)檢測(cè)反應(yīng)，所以反應(yīng)不一定要在設(shè)置時(shí)間到達(dá)后結(jié)束，可以在擴(kuò)增曲線(xiàn)進(jìn)入平臺(tái)期后（已經(jīng)沒(méi)有新的 DNA 合成）結(jié)束。因?yàn)閜hi29 DNA 聚合酶有很強(qiáng)的 3-5 外切酶活性，在聚合反應(yīng)停止后，它可能會(huì)進(jìn)入酶切模式，逐漸降解已經(jīng)合成的DNA。
3.65℃保溫 10 分鐘滅活酶。由于 phi29 DNA 聚合酶有很強(qiáng)的 3-5 外切酶活性， 因此必須滅活，否則它將逐漸降解已經(jīng)合成的DNA。
4.典型實(shí)驗(yàn)結(jié)果。有擴(kuò)增的樣本將有平緩的 S 熒光曲線(xiàn)，無(wú)模板對(duì)照將沒(méi)有此標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)增曲線(xiàn)（見(jiàn)下圖）或擴(kuò)增曲線(xiàn)：
5.如果沒(méi)有熒光定量 PCR 儀器，則只能電泳檢測(cè)或PCR 檢測(cè)是否有擴(kuò)增。
6.擴(kuò)增所得 DNA 可以用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
選擇我們的染料法實(shí)時(shí) RCA 試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！
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