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　　诺博莱德酵母核糖体提取试剂盒（低速离心法）

　　酵母核糖体提取试剂盒(低速离心法)蛋白提取

　　- 产品货号：P5141

　　- 产品名称：酵母核糖体提取试剂盒（低速离心法）

　　- 产品规格：50T/100T

　　- 适用样本：酵母

　　- 储存条件：2-8℃，12个月

　　具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

　　一、产品特点

　　低速离心法：采用低速离心技术，操作简便，适合实验室常规设备；

　　高效提取：能够高效提取酵母核糖体，提取的核糖体具有完整的生物活性；

　　兼容性强：提取的核糖体可用于多种下游实验，如Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀等。

　　二、使用方法

　　1、细胞准备：

　　- 取1-2×10?个酵母细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，收集细胞。

　　- 用冷PBS洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

　　2、提取步骤：

　　- 加入500μL冷的试剂A，置冰上10分钟。

　　- 用匀浆器充分匀浆，然后在4℃，1000×g力条件下离心5分钟。

　　- 将上清吸入另一预冷的干净离心管，在4℃，11000×g力条件下离心10分钟。

　　- 将上清再次离心（12000-16000×g，10分钟），弃沉淀，留上清。

　　- 在上清中加入125μL试剂B，充分混匀，2-8℃静置过夜。

　　- 在4℃条件下，10000×g离心20-45分钟，小心移除上清，收集沉淀。

　　- 沉淀即为核糖体。

　　3、注意事项：

　　- 实验过程中的所有试剂须预冷，所有器具须放-20℃冰箱预冷。

　　- 整个过程须保持样品处于低温，以避免蛋白降解。

　　- 最好使用Dounce匀浆器匀浆，如果没有，也可用普通玻璃匀浆器，但核糖体蛋白回收率会下降。

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