诺博莱德 KOD DNA Polymerase（含超纯dNTP )PCR相关

KOD DNA Polymerase (含超纯 dNTP)

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产品内容

保存条件

-20℃保存，有效期 2 年。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

产品简介

KOD DNA Polymerase 是从克隆有Thermococcus Kodakaraensis DNA聚合酶基因的质粒在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来。该酶所具有的超qiang3’→ 5’外切酶活性使得其保真性比Pfu DNA Polymerase 更高，保真性是Taq DNA Polymerase的80倍，同时具有合成速度快的特点，聚合速度约为普通Pfu DNA Polymerase的5倍，Taq DNA Polymerase的2倍，达到100-138bp/秒，可以在短时间内获得高产量的扩增产物，特别适合于高保真地扩增6kb以内的PCR 产物，扩增所得的DNA为平末端，可直接用于Blunt (平末端)载体克?。–at#V116、V117），也可用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。

活性单位:

KOD DNA Polymerase 活性定义为在 75°C 活性测定条件下，在 30 min内摄入 10nmoles 的 dNTPs 使成为酸性不溶物时所需要酶的活性定义为1U。

质量控制:

SDS-PAGE 检测纯度大于 99%，经检测无外源核酸酶活性；PCR 方法检测无宿主残余 DNA，能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。

适用范围：

用于DNA的高保真扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析（SNP）和平末端补平等。

注意事项：

高保真KOD对于dNTP纯度要求很高，因此建议用本酶配套的超纯dNTP mix。

KOD DNA Polymerase的使用说明：

一、配制 PCR 反应体系：(于冰上配制)

参考模板用量（50 μl 反应体系）：

质粒：5-20 ng；细菌基因组：10-100 ng；人类基因组：50-100 ng；cDNA：1-2 μl 。

注意：用 ddH2O 补足反应体系（体积）至 50 μl。实际操作中，首先要计算好需要补加ddH2O 的量以后，建议先加水，然后按上述顺序添加其它成分，最后添加 KOD DNA Polymerase。充分混匀后，离心数秒使反应混合物沉到管底，然后将反应管置于 PCR 仪中进行扩增。

二、设置 PCR 循环条件：（请根据实际情况适当调整）

注意：一般情况下，Annealing Temperature = Tm - 5°C

如果扩增片段小于 4 kb，建议 KOD 酶的延伸速度为 1kb / 15 sec；

如果扩增片段大于 4 kb，建议延伸速度为 1kb / 20-30 sec。

三、结果检测：反应结束后取 5 µl 反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。

KOD DNA Polymerase（含超纯dNTP )PCR相关

北京诺博莱德科技有限公司始创于2012年，总部位于北京海淀区，专注于科研生物领域，是一家研发、销售和服务于一体的企业。公司秉承“诚信为本，博采众长"的发展理念，致力于为科研工作者提供高质量的生物产品和服务。

诺博莱德的产品覆盖面广泛，包括以下

生化试剂：抗生素、蛋白质、染色剂、细胞培养基、缓冲试剂、对照品、标准品、磁珠、维生素、酶和辅酶、分离试剂、表面活性试剂、碳水化合物；

即用型试剂：常规试剂溶液、即用型染色液、免疫学试剂、细胞生物学、分子生物学、检测试剂盒、细胞分离液人或其他动物细胞、荧光定量、蛋白酶系列；

通用耗材：超滤离心管、吸头/盒、离心管/盒、封板膜、PCR耗材、滤纸、口罩手套、冷冻存管/盒、培养板/皿/瓶、酶标条/板、巴氏吸管、载玻片、盖玻片、包埋/盒/模具、封片剂、刀片、石蜡、印迹膜、蓝盖瓶、研磨器材、透析袋/夹子、血凝板、记号笔、注射器、加样槽、取样杯、细胞筛网、细胞刮刀/铲、单道多道手动自动移液器/支架、防卷板等产品被国内科研工作者广泛应用。