超氧阴离子清除能力试剂盒说明书

分光光度法 50 管/48 样

超氧阴离子清除能力试剂盒 抗氧

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。

测定原理：

AP-TEMED 系统产生超氧阴离子，与盐酸羟胺反应生成 NO2－，NO2－与对氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成红色的偶氮化合物，在 530nm 处有特征吸收峰，样品对超氧阴离子的清除能力与 530nm 的吸光值呈负相关。

组成：

自备仪器和用品：

天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿、恒温水浴锅。

样品处理：

组织：按照质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1ml 提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。

细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1ml提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 4℃，10000g离心 10min，取上清置于冰上待测。

培养液或其它液体：直接检测。

粉剂药物可配制成相同浓度，比如 1mg/ml。

测定操作表：

注意：对照管只需测定一次。

计算公式：

超氧阴离子清除率 I%= A对照管- A测定管?100%

A对照管

注意事项：

试剂一 4℃可保存 2 个月，配制好的试剂二 4℃可保存一周，建议实验前配制，并尽快使用。

样品处理完后立即进行测定，或者低温保存不超过 24 小时。

超氧阴离子清除能力试剂盒 抗氧