NobleRyderBC1698 Caspase-1活性检测试剂盒Caspase-1 Activity Assay Kit

产品货号：BC1698

产品名称：Caspase-1活性检测试剂盒Caspase-1 Activity Assay Kit

英文名称：Caspase-1 Activity Assay Kit

产品规格：50T/100T/20T

Caspase-1活性检测试剂盒 细胞凋亡

产品简介：

检测方法：比色法 Colorimetric

储存条件：Store at -20℃，6 months

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyderBC1698 Caspase-1活性检测试剂盒Caspase-1 Activity Assay Kit是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含 10多个成员。Caspase-1是唯 yi可剪切 Ⅱ-1b 和Ⅱ-18 前体产生活性细胞因子的 caspase。Caspase-1通过剪切 BcI-XL 调节细胞凋亡，并通过对细胞因子前体的剪切来调控相关细胞因子介导的免疫炎性反应。

基于 Caspase-1 特异水解多肽底物Tyr-Val-Ala-Asp-3-nitroanilide (YVAD-pNA)，释放的游离xiao基苯胺pNA 在405nm 有最大吸收峰。采用可见光光度比色法测定pNA而得到Caspase 活性。适用于检测哺乳动物组织、细胞Caspase-1活性。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、100mL 玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

1、培养细胞:先收集细胞到离心管，离心后弃上清;按照细胞数量(约106个)加100L试剂二(若裂解不充分可提高至 150-200L),震荡重悬沉淀，置冰上静置15 min,15000g4℃离心10-15min,取上清置冰上待测。

2、组织:按照组织质量(g)：试剂二体积(mL)为1:5-10的比例(建议称取约 0.1g组织，加入1mL 试剂二)，冰浴研磨或充分剪碎，置冰上静置15min，4℃，15000g离心10-15min，取上清置冰上待测。

测定步骤

1、可见分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长至 405 nm，分光光度计蒸馏水调零。

2、标准溶液的稀释:将5mmolpNA 标准品用标准品稀释液稀释至 200、100、50、25、12.5、0umol 的标准溶液备用。

注意事项:

1、由于试剂二中含有还原剂(DTT)，建议将样品用水稀释2倍后，用Bradford 法测定蛋白浓度，以降低 DTT对蛋白浓度测定的干扰。不建议使用BCA法测定蛋白浓度。

2、Caspase 活性测定值低最常见的原因是细胞未发生凋亡或细胞量太少，其次是观测时间不恰当。诱导凋亡时，并非剂量越大时间越长 Caspase 活性就越高。建议设置不同剂量和时间点如 0、2、4、8、16、24小时，以检测优良的观察点。

3、所测样本的值高于标准曲线上限shi，可用试剂二稀释样本后重新测定。

4、盖紧 96孔板盖子并用封口膜密封。37℃孵育，肉眼可见颜色变黄时的 OD405值约为0.2，此时即可测定。颜色变化不明显可延长反应或过夜，但酶活性较强时，孵育时间过长将导致反应失去线性关系。

Caspase-1活性检测试剂盒 细胞凋亡 

产品订购信息：

BC1698 Caspase-1活性检测试剂盒Caspase-1 Activity Assay Kit  50T/100T/20T