NobleRyder C9118 Turbo感受态细胞

产品货号：C9118

产品名称：Turbo 感受态细胞

产品规格：10*100μl

Turbo感受态细胞 载体构建

产品简介：

储存条件：-70℃

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder C9118 Turbo 感受态细胞

是采用大肠杆菌Turbo菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。Turbo 菌株是生长最快的大肠杆菌菌株，菌株平板上6.5小时可见克隆，摇菌4-6小时可提取质粒。核酸内切酶 (endA1)基因的缺失有利于提高质粒DNA的产量和质量。菌株的LacIq基因的表达受到严格控制，可克隆毒性基因。ΔlacZM15基因的存在可用于蓝白斑筛选。菌株还具有抗T1噬菌体感染的特点。Turbo感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率大于109cfu/μgDNA。

基因型:

F'proA+B+lacIqΔlacZM15/fhuA2Δ(lac-proAB)glnVgalK16galE15R(zgb-210::Tn10)TetSendA1thi-1Δ(hsdSmcrB)5

菌株抗性: 对氨苄qing霉素、氯mei素、卡na霉素、壮观mei素、链mei素、四huan素敏感。

操作方法：（以下操作均按无菌条件的标准进行）

1.将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入质粒DNA或5-10μL连接产物到细胞中，用手指拨da管底，轻轻混匀。

2.冰水浴中静置30分钟。

3.42℃热击60秒钟，不要晃动。

4.冰水浴中静置2分钟。

5.加入500μL 的室温的SOC或LB培养基。

6.置于37℃摇床中，150-200rpm 震荡复苏培养60分钟。

7.取 50-100μL 菌液涂布在含有抗性的LB平板上。待液体吸干后，倒置平板，37℃过夜培养。

（平板划线分离法：复苏培养结束后，12000rpm 离心30秒钟，弃掉上清，留100μL左右的液体，用200μL 吸头轻轻吹打散菌块，取10μL重悬的菌液分多点滴在平板上，倾斜吸头，用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更大的单克隆菌落。此方法主要适用于质粒转化，连接产物转化最好用涂布法。）

（质?？焖僮街瑁憾杂诎避星鄊ei素抗性的质粒，将步骤2的时间缩短到5分钟，完成步骤4后，可直接涂布或划线于含氨苄qing霉素抗性的LB平板上。其它抗性的质粒仍需60分钟的复苏培养。）

注意事项：

1．感受态细胞应保存在-70℃，不可反复冻融，否则其转化效率将会降低。

2．实验过程中应严格无菌操作，防止其它DNA或杂菌的污染，避免为以后的筛选、鉴定带来影响。

3．转化时，转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比，但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。

4．转化率的计算：转化率＝产生菌落的总数/铺板DNA总量。

5．为防止转化实验不成功，可以保留部分连接产物，以重新转化，将损失降到最di。

Turbo感受态细胞 载体构建 

产品订购信息：

C9118 Turbo 感受态细胞  10*100μl