OVISE 人卵巢癌细胞

细胞来源：国家资源库

细胞背景：OVISE 人卵巢癌细胞来源于一名40岁卵巢肿瘤IIb 期患者。

细胞特性： 形态：上皮细胞样，贴壁生长。 用途：仅供科研使用。

培养条件：
1）准备1640 培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2）培养条件： 空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%

注意事项：

一.消毒静置等细胞稳定后拍照100X和200X。弃去培养上清，用PBS润洗细胞1-2次并吸走。

二. T25瓶加入0.25％EDTA胰蛋白酶1-2ml于培养瓶中震荡混匀，如果属于贴壁不牢固的细胞很容易脱落的就培养箱外面消化震荡待脱落90%以上终止消化，一般小于1分钟以内，甚至不加胰酶有部分贴壁非常不牢固的细胞也会自然震荡脱落。如果是贴壁牢固的细胞则置于37℃培养箱中消化提高效率，每40-50秒拿出培养箱震荡帮助细胞脱落，如脱落90%以上则对应3-6ml含有10%血清的专用培养基终止，以防胰酶残留损伤细胞。如果贴壁非常牢固的细胞，脱落的比例比较低，也不超过2分钟后终止消化，再加入1ml专用培养基让细胞缓冲后再过2分钟进行二次消化，反复分步消化以降低单次消化时长，减少刺激，保护细胞膜?；虿捎霉尾蜗赴姆绞酱硪部梢浴Ｗ芄樵蚴谴锏较康牡耐奔跎傧赴な艿降乃鹕嗽叫≡胶?。

三.消化完成后轻轻吹匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶/6cm培养皿中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的专用培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2和以上比例进行，具体以实际细胞密度决定。期间多的细胞一定保存多份细胞冻存管备种。

悬浮细胞参考：

大多数悬浮细胞对于环境比较敏感，建议一直维持高密度生长，一般情况下细胞密度维持在1×10 5到1×10 6个/mL（不同细胞对密度要求不同）。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中800-1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例（第一次可以1:1分瓶）分到新T25瓶中，添加5-6ml按照说明书要求配置的新的专用培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2和以上比例进行。大多数血液类相关的悬浮细胞受运输影响比较大，会出现一批死细胞，如果因此密度降低了，可以离心后转移至T25瓶中竖着培养，培养基添加5ml 以提高总体密度，隔一天后观察密度可以的话再补液3ml专用培养基后T25瓶放倒，等沉淀稳定后观察细胞密度，持续添加培养基等密度上升足够传代为止。

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注意事项

1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及口罩操作；

2、为保持本产品的优良使用效果，请务必按照建议的储存条件进行保存；

3、本产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。

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