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技術手冊 - 聚合酶鏈式反應PCR

閱讀:48      發(fā)布時間:2025-04-23
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聚合酶鏈式反應,又稱為PCR,是分子生物學技術之一。20世紀70年代,研究人員報道了使用合成引物和DNA聚合酶從模板復制單鏈DNA。然而,直到1983年,Kary Mullis才發(fā)明出用于擴增目標DNA的研究工具,就是我們今天所熟知的PCR方法。從此以后,PCR成為分子生物學研究不可少的一部分,被廣泛應用于基礎研究、疾病診斷、農業(yè)檢測和法醫(yī)鑒定等領域。而Kary Mullis也因這一發(fā)明獲得了1993年的諾貝爾化學獎。

PCR是一種能夠在短時間內將單個DNA分子擴增數百萬倍的生化過程。其擴增過程包括三個連續(xù)步驟:(1)變性(Denaturation),對雙鏈DNA模板進行高溫加熱,使其解離;(2)退火(Annealing),被稱為引物的短DNA分子與目標DNA的側翼區(qū)域結合;(3)延伸(Extension),DNA聚合酶沿著模板鏈將引物3'端進行延伸。將這些步驟重復25-35次,即可按指數方式獲得大量的目標DNA拷貝(圖1.1)。

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賽默飛世爾科技(中國)有限公司

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