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羅氏LC480實時熒光PCR儀介紹

閱讀:114        發(fā)布時間:2025-6-10

羅氏LightCycler 480(簡稱羅氏LC480)實時熒光定量PCR儀是分子生物學領域廣泛應用的檢測設備之一,其設計旨在滿足科研、臨床診斷及藥物開發(fā)等領域對核酸定性與定量分析的高精度需求。以下從技術特點、應用場景及性能優(yōu)勢等方面進行系統(tǒng)介紹。

一、技術特點

  1. 光學檢測系統(tǒng)
    羅氏LC480采用多通道熒光檢測模塊,支持6種熒光染料同時檢測,波長范圍覆蓋450 nm至710 nm。光學組件配備高靈敏度CCD攝像頭,可實現(xiàn)動態(tài)范圍達10個數(shù)量級的信號采集,適用于低拷貝數(shù)樣本的精確檢測。

  2. 溫控系統(tǒng)
    儀器搭載基于Peltier技術的梯度溫控模塊,升溫速率達4.8°C/秒,控溫精度為±0.1°C。支持96孔或384孔板運行,各孔間溫度均一性差異小于0.2°C,確保反應條件的一致性。

  3. 數(shù)據(jù)分析軟件
    配套的LightCycler 480 Software提供多重分析模塊,包括擴增曲線分析、熔解曲線分析、相對/絕對定量及基因分型功能。軟件符合21 CFR Part 11標準,支持審計追蹤和數(shù)據(jù)加密,滿足臨床實驗室合規(guī)要求。

二、應用場景

  1. 基礎研究
    適用于基因表達分析(如qRT-PCR)、microRNA檢測及表觀遺傳學研究(如甲基化分析)。多色熒光通道設計可同時檢測內參基因與目標基因,提升數(shù)據(jù)可比性。

  2. 臨床診斷
    通過CE-IVD認證的檢測項目可用于病原體核酸檢測(如HPV分型、HBV病毒載量監(jiān)測)和腫瘤標志物篩查。閉管檢測設計降低交叉污染風險,符合生物安全二級實驗室標準。

  3. 藥物開發(fā)
    支持藥物靶點驗證、siRNA效率評估及轉基因生物拷貝數(shù)鑒定。梯度PCR功能可快速優(yōu)化引物退火溫度,縮短實驗周期。

三、性能參數(shù)

  • 通量靈活性:支持單批次96孔(0.2 mL)或384孔(0.1 mL)反應體系,每日最大處理樣本量超過3000例。

  • 檢測靈敏度:可識別低至5拷貝/μL的DNA模板,線性相關系數(shù)(R2)>0.99。

  • 兼容性:適配SYBR Green I、TaqMan探針、FRET雜交探針等多種化學試劑。

四、質量控制

儀器內置自檢程序,定期校準可確保光學與溫控系統(tǒng)的長期穩(wěn)定性。通過參與外部質評計劃(如CAP認證),用戶可驗證檢測結果的可靠性。

五、維護與支持

羅氏提供年度性能驗證服務及模塊化維修方案。耗材方面采用標準化設計,用戶可獨立完成光源更換或濾光片校準。

總結而言,羅氏LC480憑借其模塊化設計、多色檢測能力及標準化數(shù)據(jù)分析流程,為分子檢測實驗室提供了可擴展的技術平臺。其性能參數(shù)經多篇學術文獻驗證(如《Clinical Chemistry》2015年刊載的方法學比較研究),在傳染病監(jiān)測、癌癥基因組學等場景中具有廣泛適用性。用戶需根據(jù)實驗需求選擇適配的耗材與軟件分析模塊,以充分發(fā)揮設備功能。


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