Rab4相互作用蛋白抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類(lèi)型顯著影響抗體對(duì)靶蛋白的特異性。選擇針對(duì)不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無(wú)法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對(duì)已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類(lèi)似三級(jí)結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過(guò)程中添加到肽中，否則它們不會(huì)表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因?yàn)橛捎跇悠诽幚磉^(guò)程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時(shí)，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對(duì)它們產(chǎn)生的抗體可能無(wú)法識(shí)別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識(shí)別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對(duì)于單克隆抗體尤其如此。

This gene encodes a protein that contains a RUN domain and a FYVE-type zinc finger domain. The encoded protein binds to phosphatidylinositol-3-phosphate (PI3P) and plays a role in early endosomal trafficking, tethering and fusion through interactions

1、制備抗原。

2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

3、動(dòng)物免疫。

4、試取血進(jìn)行測(cè)試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對(duì)異種動(dòng)物而言，是良好的抗原物質(zhì)。可以刺激異種動(dòng)物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當(dāng)提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動(dòng)物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔

4．其它材料及試劑

細(xì)菌聚甲基半乳糖醛酸酶（Polymethylgalacturonase；PMG）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

基質(zhì)金屬（MMP）明膠酶譜法（zymography）

細(xì)菌菌落直接PCR檢測(cè)法

冰凍切片組織CASPASE-6蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

植物性食物樣品處理試劑盒

透射電鏡（TEM）環(huán)氧樹(shù)脂

血液磷酸二酯酶1（PDE1）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

活體細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）原位比色法定量檢測(cè)試劑盒（超氧陰離子）

石蠟切片黑色素去色試劑盒

細(xì)菌5-羥色胺-N-乙?；D(zhuǎn)移酶（Serotonin N-Acetyltransferase）活性

APC蛋白免疫共沉淀分析試劑盒

飲料氨一步法定量檢測(cè)試劑盒

石蠟切片組織COLLAGEN II蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

組織基質(zhì)金屬 3H同位素標(biāo)記檢測(cè)試劑盒（不包括同位素）

純化氧化酶活性測(cè)定試劑盒

長(zhǎng)鏈脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體

肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子抗體

缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰4羥化酶抗體

KIAA0748蛋白抗體

細(xì)胞角蛋白7抗體

α紅細(xì)胞分化相關(guān)因子抗體

賴(lài)特異性脫甲基酶2抗體

Rab4相互作用蛋白抗體ATP-依賴(lài)的RNA解旋酶29抗體