mRNA結(jié)合蛋白抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果。應(yīng)注意選擇針對已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級結(jié)構(gòu)。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑，因為由于樣品處理過程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對它們產(chǎn)生的抗體可能無法識別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位。對于單克隆抗體尤其如此。

Mutations in Rae1 and Gle2(Saccharomyces cerevisae homolog) genes have been shown to result in accumulation of poly(A)-containing mRNA in the nucleus, suggesting that the encoded proteins are involved in RNA export. It contains four WD40 motifs,

1、制備抗原。

2、選擇實(shí)驗動物。

3、動物免疫。

4、試取血進(jìn)行測試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實(shí)驗動物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對異種動物而言，是良好的抗原物質(zhì)?？梢源碳ぎ惙N動物產(chǎn)生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當(dāng)提取后，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實(shí)驗動物 兔

4．其它材料及試劑

真菌/酵母NADP依賴性甘油醛-3-磷酸脫氫酶（NADP-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase；NADP-GAPDH）活性光譜法定量檢測試劑盒

RNA酶溶液（RNA酶保護(hù)分析）

植物游離吲哚-3-（IAA）比色法定量檢測試劑盒（包括萃取）

石蠟切片組織IKB-ALPHA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒

通用型草環(huán)斑病毒（Tobacco Ringspot Virus；TRSV）

S腺苷同型半（SAH或AdoHcy）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒

血液總酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒

白陶土部分凝血活酶時間（KPTT）檢測試劑盒

血液還原型甘肽（GSH）濃度比色法定量檢測試劑盒

細(xì)菌色肉湯

石蠟切片組織BAD蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

面食果糖比色法定量檢測試劑盒

C. krusei RFLP基因分析試劑盒

組織PDK1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

動物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量檢測試劑盒

植物延長蛋白（擬南芥）

孤兒核受體PAR1抗體

溶酶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體

L選擇素抗體

細(xì)胞粘附分子1抗體

癌癥亮拉鏈下調(diào)因子1樣蛋白抗體

磷酸二酯酶7抗體

mRNA結(jié)合蛋白抗體Cappuccino蛋白抗體