义翘神州  MCHOGSI-1L  SMM CHO-GSI CHO细胞无血清培养基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表达系统

义翘神州 SMM CHO-GSI CHO细胞无血清培养基-常备现货

北京义翘神州科技股份有限公司是一家从事生物试剂研发、生产、销售并提供技术服务的生物科技公司。所有产品都是自主研发和生产的，主要业务包括重组蛋白、抗体、基因和培养基等产品，以及重组蛋白、抗体的开发和生物分析检测等服务，同时也为制药公司或生物技术公司提供单克隆抗体候选药物的临床前规模生产服务。义翘神州的产品能够覆盖生命科学研究的多个领域，为分子生物学、细胞生物学、免疫学、发育生物学、干细胞研究等基础科研方向和创新药物研发提供“一站式"生物试剂产品和技术服务。

义翘神州  MCHOGSI-1L  SuperNuclease核酸酶残留检测试剂盒  SMM CHO-GSI CHO细胞无血清培养基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表达系统  1L，产品简介：

产品品牌：义翘神州

产品货号：MCHOGSI-1L

产品名称：SuperNuclease核酸酶残留检测试剂盒  SMM CHO-GSI CHO细胞无血清培养基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表达系统

产品规格：1L

义翘神州  MCHOGSI-1L  SuperNuclease核酸酶残留检测试剂盒  SMM CHO-GSI CHO细胞无血清培养基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表达系统  1L，产品说明：

产品描述

SMM CHO-GSI 培养基主要是为提高CHO稳定株的蛋白产量而开发的，无血清，无动物源成分的培养基。不含L-谷an酰an，使用时需加入4mM的L-谷an酰an。不含HT。推荐用于CHO GS表达系统。

产品特点

蛋白表达量高，细胞生长好，严格的质控，批次稳定性好。

产品用途

仅用于科学研究，不推荐用于人类或动物的诊断和治疗。

储存条件

2-8℃避光储存12个月。

培养方法

（一）细胞复苏

1.取出冻存管，迅速在37℃水浴锅里融化，整个过程最好控制在1分钟以内。

2. 轻轻地混匀细胞并全部移到50ml的离心管中，逐滴加入 5-8ml在37℃水浴锅里预热的新鲜培养基。 100g，5min离心细胞。

3. 倒掉上清，用10-20mL在37℃水浴锅里预热好的新鲜培养基重悬细胞，放到100mL培养瓶中。 然后将细胞放到37℃，5%的CO2恒温摇床中，110-175rpm培养。

4. 2-5天后取样计数细胞密度和活率，如果细胞密度达到1.0X106cells/ml，则24进行正常传代培养； 如果细胞密度低于1.0X106cells/m，则收集细胞进行离心处理，100g，5min。 然后重悬到20-30ml已经在37℃水浴锅里孵育好的新鲜培养基，继续培养。

5. 细胞生长正常后，传代时起始密度控制在0.3X106cells/ml ，3-4天传一次代。

注意事项：冻存管融化速度越快越好； 由于刚复苏的细胞比较脆弱，所以整个过程要轻以免损伤细胞。

（二）细胞传代

1. 取样计数细胞，计算细胞密度。

2. 按照起始细胞密度0.3-0.4X106cells/ml，计算所需细胞悬液和培养基的用量传代，100ml的培养瓶中放15-20ml培养（或250ml的培养瓶放50-60ml培养）。 37℃恒温培养箱中培养，5%CO2，摇床转速：110-175rpm。

3. 每3-4天传一次代，起始细胞密度传到0.2-0.3X106细胞/ml。

如何使 CHO 稳定的应变细胞适应 SMM CHO-SI 培养基：

通常情况下，细胞不经过驯化而能直接适应SMM CHO-GSI培养基，下面我们推荐2种方式来更换培养基：1）直接更换； 2）逐步更换。 首先选用的细胞要在对数生长期，同时细胞活率大于90%。

（三）直接更换

1. 细胞培养在加5-10%血清传统的培养基或其他无血清培养基里，直接稀释传代到SMM CHO-GSI培养基，细胞密度控制在0.3-0.4X106细胞/ml。

2.然后放入5%CO2、37℃的恒温培养箱中，110-175rpm转速条件下培养。

3. 3-5天后进行传代或者换液

4. 继续传代培养，起始细胞密度控制在0.3-0.4X106cells/ml，直到wan全适应SMM CHO-GSI培养基。

5. 经过几代在100%的 SMM CHO-GSI培养基中培养，传代后4-6天细胞的密度可以达到2-3X106cells/ml，细胞活率大于90%。 这时说明细胞已经wan全适应SMM CHO-GSI培养基。 注意: 如果直接更换没有成功，则进行逐步更换的方法养基。

注意: 如果直接更换没有成功，则进行逐步更换的方法

（四）逐步更换

1.细胞培养在加5-10%血清传统的培养基或其他无血清培养基里，稀释传代，细胞密度控制在0.3-0.4X106cells/ml，原培养基与SMM CHO-GSI培养基的比例为75：25。

2.然后放入5%CO2、37℃的恒温培养箱中，110-175rpm。

3. 3-5天后进行传代，如果细胞生长正常，则传代时原培养基与SMM CHO-GSI培养基的比例为50:50. 细胞密度仍控制在0.3-0.4X106细胞/ml。

重复步骤3，逐渐增加SMM CHO-GSI培养基的比例（25：75;原始培养基与SMM CHO-GSI培养基的比例为10：90），直到SMM CHO-GSI培养基的100%。

5.在100%的SMM CHO-GSI培养基中，传代后4-6天细胞的密度可以达到2-3X106cells/ml，细胞活率大于90%。这时说明细胞已经wan全适应SMM CHO-GSI培养基。

（五）冻存细胞

冻存细胞时CHO cells 要处在对数生长期同时细胞活率在90%以上。

1.取样计数细胞，根据冻存管数计算所用细胞悬液体积和冻存液的体积，比例如下：92.5%的培养基混合物（50% 的新鲜SMM CHO-GSI培养基+50% 条件SMM CHO-GSI培养基 ）+ 7.5% DMSO，最终的细胞数为 5 x 106cells/ 管。

2.准备相应体积的冻存培养基：46.25% 的新鲜SMM CHO-GSI培养基 + 7.5% DMSO，放在4°C 备用。 冻存培养基最好为当天配制。

3.通过100g，5-10min离心收集细胞，留46.25%条件培养基重悬细胞，然后逐滴加入事先准备好的放4°C 的冻存培养基。

4.混合均匀后分装细胞到冻存管中，一般2ml的冻存管放1-1.5ml，贴好标签。

5.然后放到冻存盒中，放入-80°C 冰箱(每分钟下降1°C)。

6.80℃冰箱中过夜放置（至少放置24小时），转移细胞到液氮罐中，推荐储存条件在-125°C to -200°C。

义翘神州 SMM CHO-GSI CHO细胞无血清培养基-常备现货 

产品订购信息：

MCHOGSI-1L  SuperNuclease核酸酶残留检测试剂盒  SMM CHO-GSI CHO细胞无血清培养基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表达系统  1L