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细胞名称：N1E-115小鼠神经母细胞瘤细胞ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

细胞收到后处理

培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶，消毒后放到超净台内严格无菌操作，将细胞瓶放入37℃、5%CO₂的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（最好40x,100x,200x各一张），前三天照片是重要售后依据，不提供照片默认收到状态良好。（注意密封培养瓶放入培养箱时要将盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶的培养基，另外一瓶用自己配的培养基，以便进行对比培养）

培养时的注意技巧

1.换液前将培养瓶竖在培养箱静置1小时左右，轻轻吸掉3ml左右培养基，然后加入3ml的新鲜培养基，混匀后放入培养箱中培养。

2.如果细胞密度比较稀，培养基没有明显变化，可以加入500ul的FBS混匀后，竖着培养。

3.传代时，先按照换液步骤处理，吸掉3ml左右培养基后，加入10ml的新鲜培养基，混匀后分2个T25培养瓶培养。

4.培养一周左右可以离心一次，以去除一些死细胞。

5.该细胞比较脆弱，培养过程中不要频繁拿出来观察，以免影响细胞的生长。

6.该细胞的生长环境比较敏感，需使用较好的血清培养。

7.建议使用未TC处理的瓶或者皿培养。

订购建议：

为避免收到细胞后离心处理，推荐使用15ml离心管发货，到货后直接分装到2个T25培养瓶即可。

注意事项：有些细胞比较特殊，如贴壁不牢，在运输过程中发生容易细胞脱落，这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入消化液1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂细胞培养箱中培养。

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