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细胞名称：SHEP1人神经母细胞瘤细胞ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

细胞收到后处理

培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶，消毒后放到超净台内严格无菌操作，将细胞瓶放入37℃、5%CO₂的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（最好40x,100x,200x各一张），前三天照片是重要售后依据，不提供照片默认收到状态良好。（注意密封培养瓶放入培养箱时要将盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶的培养基，另外一瓶用自己配的培养基，以便进行对比培养）

培养前的工作准备充分

包括耗材的处理、试剂的配置，无菌检验等等。

玻璃器皿的清洗。对于玻璃器皿（细胞瓶、装营养液的瓶子、小青m素瓶等）要先用洗衣粉刷干净（注意死角），然后冲干净。用酸液浸泡 24 h 以上，之后用清水冲洗 10 遍，除去残留酸液。瓶子之类，冲洗过程要使劲摇晃。然后在双蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎，160℃ 干烤 2 h 待用。

试剂配置。细胞培养用的液体一般使用双蒸以上的水即可。并注意 pH 值的调节。

无菌检验。主要采用过滤除菌：如抗生素、G-418 溶液、各类培养基、丙酮酸钠等。有些可以采用高压灭菌，如 PBS、D-Hank's等。

试剂分装保存

包括营养液、血清等。

血清特别重要。血清必须贮存于 –20℃，如果一次无法用完一瓶，可将 40～50ml 分装于无菌酸处理瓶中，甚至置青m素瓶保存。一般厂商提供的血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。（一般情况下不影响细胞培养）

瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃ 冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。

热灭活是指 56℃，30 分钟加热已解冻之血清。水浴锅升到 56℃后，将血清放入，待温度升高到 56℃ 后计时，一般 5 分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清（包括不同批次）对细胞的影响。

注意事项：有些细胞比较特殊，如贴壁不牢，在运输过程中发生容易细胞脱落，这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入消化液1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂细胞培养箱中培养。

YS1073CTE7人食管鳞癌细胞

YS1074CRBVEC大鼠脑静脉内皮细胞

YS1075CHN4人喉鳞癌细胞

YS1076CKYSE510人食管鳞癌细胞

YS1077CIHC-ST1人肝内胆管癌细胞

YS1078CC57/B6-L小鼠肺成纤维细胞

YS1079CHUCEC人正常宫颈上皮细胞

YS1080CSNU354人肝癌细胞

YS1081CMUS-M1小鼠小肠平滑肌细胞

YS1082CJHH-2人肝癌细胞

YS1083CHMC3人小胶质细胞

YS1084CMIMVEC小鼠肠黏膜微血管内皮细胞

YS1085CCNE-2Z人鼻咽癌细胞

YS1086CUMUC-14人肾癌细胞

YS1087CACC-M人涎腺癌细胞

YS1088COVCAR5人卵巢癌细胞

YS1089CSEG-1人食管腺癌细胞

YS1090CCOLO829人皮肤黑色素瘤细胞

YS1091CMPC-11小鼠浆细胞瘤细胞

YS1092ChRPTC人近端肾小管上皮细胞

YS1093CKP2人胰腺癌细胞

YS1094CCo-115人结肠腺癌细胞

YS1095CPA-1人卵巢畸胎瘤细胞

YS1096CHEM-L人表皮黑色素细胞

YS1097CSNU-387人肝癌细胞

YS1098CSR-786人间变性大细胞淋巴瘤细胞

YS1099CMA-782小鼠乳腺癌细胞

YS1100CT98人脑胶质细胞瘤细胞

YS1101CMUG-Chor1人骶骨脊索瘤细胞

YS1102CEOL-1人急性髓系白血病细胞

YS1103CCG4大鼠少突胶质前体细胞

YS1104CCOV362人卵巢癌细胞

YS1105CSCC154人舌鳞癌细胞

YS1106CZYM-SVEC01猪静脉血管内皮细胞

YS1107CS37小鼠肉瘤细胞

YS1108CIFRS1大鼠雪旺细胞

YS1109CL-WRN小鼠皮下结缔组织细胞

YS1110CHSKMC人骨骼肌细胞

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