不同類型的Elisa試劑盒在設計上的主要區(qū)別如下：
1. 直接法 vs. 間接法
直接法
使用酶標記的一抗直接結合抗原
優(yōu)點: 操作簡單
缺點: 靈敏度較低
間接法
使用未標記的一抗結合抗原后,再用酶標記的二抗進行信號放大
優(yōu)點: 靈敏度更高
缺點: 步驟更多,背景噪音可能增加
2. 夾心法 (Sandwich ELISA)
需要兩種匹配抗體,分別作為捕獲抗體和檢測抗體
優(yōu)點: 特異性強,適合大分子(如蛋白質)
缺點: 成本高,需優(yōu)化配對
3. 競爭法 (Competitive ELISA)
待測抗原與標記抗原競爭結合有限數(shù)量的抗體
優(yōu)點: 適合小分子或半抗原
缺點: 靈敏度較低,結果需反向解讀
4. TRF/CLEIA (時間分辨熒光/化學發(fā)光)
采用熒光或發(fā)光信號代替顯色底物
優(yōu)點: 超高靈敏度,適合低豐度靶標
缺點: 需專用儀器,成本高
5. Instant/Ready-to-use ELISA
部分組分預包被或凍干,減少操作步驟
優(yōu)點: 快速簡便
缺點: 靈活性較低
總結選型關鍵點
類型 適用場景 核心差異
夾心法 大分子蛋白質定量 雙抗體配對設計
競爭法 小分子/半抗原 反向信號解讀
直接/間接法簡單篩查 vs. 高靈敏度需求 一抗是否標記
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