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淺析凝膠色譜凈化系統(tǒng)的測(cè)定流程

閱讀:269      發(fā)布時(shí)間:2025-3-19
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  凝膠色譜凈化系統(tǒng),特別是凝膠滲透色譜(GPC)系統(tǒng),在現(xiàn)代分析化學(xué)、生物化學(xué)及環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域中扮演著至關(guān)重要的角色,利用多孔凝膠作為固定相,根據(jù)分子大小的差異對(duì)樣品進(jìn)行分離。大分子物質(zhì)由于無(wú)法進(jìn)入凝膠孔隙而先流出,小分子物質(zhì)則進(jìn)入孔隙并后流出,從而實(shí)現(xiàn)不同大小分子的有效分離。這種分離機(jī)制對(duì)于去除樣品中的大分子雜質(zhì),如蛋白質(zhì)、多糖等,以及富集目標(biāo)小分子化合物,如藥物活性成分、環(huán)境污染物等,具有重要意義。
 
  凝膠色譜凈化系統(tǒng)的測(cè)定步驟:
 
  1.樣品準(zhǔn)備:將待測(cè)樣品溶解在適量的溶劑中,使其濃度達(dá)到適合測(cè)定的范圍。溶液中的固體顆粒應(yīng)盡量去除,可通過(guò)過(guò)濾或離心操作來(lái)完成。
 
  2.儀器檢查:打開(kāi)儀器電源,啟動(dòng)GPC系統(tǒng)。檢查儀器各個(gè)部分的連接是否緊密,確保沒(méi)有泄漏。檢查流動(dòng)相的質(zhì)量和純度,必要時(shí)進(jìn)行更換。
 
  3.設(shè)置參數(shù):根據(jù)樣品的特性和需要選擇合適的洗脫緩沖液,并將其冷藏備用。設(shè)置流動(dòng)相的流速和溫度,一般情況下,流速根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇,溫度一般設(shè)置在室溫下進(jìn)行。
 
  4.樣品注入:使用適當(dāng)?shù)拿?xì)管或注射器將樣品注入到色譜柱中。
 
  5.開(kāi)始運(yùn)行:開(kāi)始運(yùn)行GPC實(shí)驗(yàn),記錄運(yùn)行開(kāi)始的時(shí)間。設(shè)定好GPC柱的溫度、流速和檢測(cè)器的靈敏度等參數(shù)。打開(kāi)檢測(cè)器的電源,選擇合適的檢測(cè)波長(zhǎng)或檢測(cè)器類(lèi)型。
 
  6.數(shù)據(jù)記錄:開(kāi)始樣品分離,記錄分離過(guò)程中的響應(yīng)信號(hào),并保存數(shù)據(jù)。
 
  7.數(shù)據(jù)處理:使用專(zhuān)用的GPC數(shù)據(jù)處理軟件對(duì)得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。根據(jù)響應(yīng)信號(hào)與時(shí)間的關(guān)系曲線(xiàn),計(jì)算出不同分子量的聚合物峰面積。將樣品的峰面積與標(biāo)準(zhǔn)聚合物的峰面積進(jìn)行比較,計(jì)算出待測(cè)樣品的分子量分布。
 
  8.結(jié)果輸出:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要,可以生成相關(guān)的分子量分布曲線(xiàn)或分子量平均值等結(jié)果。
凝膠色譜凈化系統(tǒng)

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