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血漿二次復(fù)凍還能用嗎?

2023-10-8  閱讀(303)

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血漿二次復(fù)凍還能用嗎?

【標(biāo)本收集注意事項】 
1.收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。 
2.血清和血漿避免使用溶血,高血脂標(biāo)本。 
3.標(biāo)本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。 
4.標(biāo)本收集后若不及時檢測,需按一次使用量分裝,凍存于-20℃,-80℃電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融。 
5.可根據(jù)標(biāo)本的實際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù)) 。
6.收集標(biāo)本,盡量做到雙份的用量,避免一次實驗失敗,重復(fù)實驗時標(biāo)本缺失,從而耽誤實驗進(jìn)程。
7.收集標(biāo)本時,應(yīng)該做好防護(hù)措施(比如戴手套,口罩,護(hù)目鏡等),認(rèn)為所有標(biāo)本都具有一定的潛在危險性。
8.樣本處理應(yīng)該在生物安全柜里面,并且正確使用生物安全柜。
樣本正確的處理方法應(yīng)該是這樣的:
【標(biāo)本處理辦法】
1.血清:將采集的全血靜置冰箱4℃過夜,然后1000-3000rpm離心10分鐘,取上清立即測試,暫時不測可以放入-20℃(1-3個月)或-80℃(3-6個月)保存。
2.血漿:用EDTA,枸櫞酸鈉,肝素等作為抗凝劑,加入血液混勻后,1000-3000rpm離
心10分鐘,取上清立即測試,暫時不測可以放入-20℃(1-3個月)或-80℃(3-6個月)
保存。
3.組織勻漿:切取組織塊,0.01MPBS中過洗一次;按照1G組織加入5-10ml組織蛋白萃取試劑的比例,在冰水中勻漿。勻漿完成后,5000-10000rpm離心10分鐘,取上清立即測試,暫時不測可以放入-20℃(1-3個月)或-80℃(3-6個月)保存。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:1000-3000rpm離心10分鐘,取上清立即測試,暫時不測可以放入-20℃(1-3個月)或-80℃(3-6個月)保存。
5.尿液,腹水,腦脊液等:1000-3000rpm離心10分鐘,取上清立即測試,暫時不測可以放入-20℃(1-3個月)或-80℃3-6個月)保存。
注:樣品稀釋的一般原則
上海繼譜的廣大客戶群體及其他用戶須查閱相關(guān)文獻(xiàn)了解標(biāo)本內(nèi)待測因子的含量,決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù),以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA試劑盒的zuijia檢測范圍。樣品的稀釋應(yīng)有詳細(xì)記錄。新鮮冰凍血漿(FFP)融化后在一定時間內(nèi)再次冰凍,血漿中各種成分的變化。方法將FFP37℃水浴融化后,測定血漿中各類凝血因子的活性、白蛋白(Alb)總蛋白(TP)含量和膽堿酯酶(CHE)活性;在12h內(nèi)將其冰凍,在7天后再次融化,測定Alb、TP、CHE和各種凝血因子的活性。結(jié)果FFP再次冷凍后,除活化部分凝血酶時間(APTT)顯著變化外(P0.05),其余凝血酶原時間(PT)、凝血酶時間(TT)、纖維蛋白原(Fbg)等凝血指標(biāo)均無明顯改變(P0.05),CHE和Alb、TP也無明顯改變(P0.05)。結(jié)論FFP融化后,如果12h內(nèi)未輸用,可以將其立即冰凍,給PT、Fbg、TT等。 


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