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蘇州珀羅汀生物技術(shù)有限公...

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創(chuàng)新前沿:CFPS技術(shù)推動合成生物學(xué)邁向新高度

閱讀:135      發(fā)布時間:2025-5-30
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“隨著科學(xué)與技術(shù)的發(fā)展,現(xiàn)在我們有能力對一個生命體進(jìn)行重新設(shè)計、構(gòu)建和合成,重新構(gòu)建一個具有全新功能的生物體,這就是所謂的合成生物學(xué)。"

——中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院副院長、深圳合成生物學(xué)創(chuàng)新研究院院長劉陳立


合成生物學(xué)技術(shù)與無細(xì)胞蛋白表達(dá)


合成生物學(xué)是一門匯集生物學(xué)、基因組學(xué)、工程學(xué)和信息學(xué)等多種學(xué)科的交叉學(xué)科,用以設(shè)計和合成各種復(fù)雜生物功能模塊、系統(tǒng)甚至人工生命體,并可應(yīng)用于特定化學(xué)物生產(chǎn)、生物材料制造、基因治療、組織工程等。其技術(shù)路徑主要包括設(shè)計、構(gòu)建、測試、學(xué)習(xí)。

在合成生物學(xué)這一跨學(xué)科領(lǐng)域中,無細(xì)胞蛋白表達(dá)(Cell-Free Protein Synthesis, CFPS)技術(shù)正以未有的速度嶄露頭角,它掙脫了傳統(tǒng)蛋白質(zhì)生產(chǎn)方式的束縛,為科學(xué)研究與工業(yè)應(yīng)用注入了新的活力。CFPS技術(shù)不僅代表了一種革命性的生產(chǎn)方式,更是蛋白質(zhì)科學(xué)領(lǐng)域的一次重大突破,是推動蛋白質(zhì)研究和應(yīng)用的強(qiáng)大工具,極大地擴(kuò)展了合成生物學(xué)的應(yīng)用邊界。

CFS技術(shù),顧名思義,是在沒有完整細(xì)胞的情況下,通過模擬細(xì)胞內(nèi)的環(huán)境,實現(xiàn)蛋白質(zhì)的體外合成。這一技術(shù)利用一套精心設(shè)計的反應(yīng)體系,包括細(xì)胞裂解液、酶、輔因子等,來構(gòu)建完整的蛋白質(zhì)合成環(huán)境。通過控制反應(yīng)條件,優(yōu)化蛋白質(zhì)的合成效率,從而實現(xiàn)大量、快速且高質(zhì)量的蛋白質(zhì)生產(chǎn)。


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圖1:無細(xì)胞蛋白質(zhì)合成(CFPS)的成分和應(yīng)用


CFPS在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用


1.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能研究


CFPS技術(shù)通過高效合成大量高純度、高活性的蛋白質(zhì)樣品,包括功能性蛋白質(zhì),通過調(diào)整反應(yīng)體系的組分和條件,可以優(yōu)化蛋白質(zhì)的合成效率和功能特性。這為蛋白質(zhì)工程提供了強(qiáng)有力的工具。使得研究人員可以深入探討蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系,揭示其在生物體內(nèi)的作用機(jī)制。此外,研究人員還可以通過構(gòu)建精細(xì)的蛋白質(zhì)工程系統(tǒng),進(jìn)行蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)改造和功能優(yōu)化,以滿足特定的應(yīng)用需求。


2.生物分子網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與驗證


研究人員可以在無細(xì)胞系統(tǒng)中模擬復(fù)雜的生物化學(xué)反應(yīng),設(shè)計并組裝出未有的生物邏輯電路、信號傳導(dǎo)途徑和代謝通路。這有助于深入理解生命現(xiàn)象的基本原理,并為藥物靶點篩選、酶催化性能優(yōu)化等工作提供有力支持。在合成生物學(xué)領(lǐng)域,CFPS技術(shù)為構(gòu)建和驗證新的生物分子網(wǎng)絡(luò)提供了可能性。已有研究利用大腸桿菌CFPS系統(tǒng)來研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,并且揭示了CD1E和B2M之間的精確親和力。



圖片

圖2:驗證CD1E和B2M之間的相互作用

2.生物傳感器設(shè)計


傳統(tǒng)的基于合成生物學(xué)的生物傳感器是在活細(xì)胞上設(shè)計的,但細(xì)胞生物傳感器的開發(fā)受到轉(zhuǎn)基因生物問題和細(xì)胞膜阻塞等缺陷的極大限制。與細(xì)胞生物傳感器相比,基于CFPS系統(tǒng)的生物傳感器具有安全性更高、靈敏度更高、響應(yīng)時間更快的優(yōu)勢,這使得無細(xì)胞生物傳感器具有更廣泛的應(yīng)用前景。


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圖3.無細(xì)胞生物傳感器系統(tǒng)的識別-響應(yīng)機(jī)制



CFPS在蛋白生產(chǎn)上的應(yīng)用


1.AI高通量蛋白篩選及優(yōu)化


結(jié)合機(jī)器學(xué)習(xí)和大規(guī)模篩選實驗,CFPS技術(shù)可以快速地識別出具有特定功能或性能的蛋白質(zhì)。通過合理的設(shè)計和優(yōu)化反應(yīng)體系,可以實現(xiàn)多個目標(biāo)蛋白的同時合成,大幅提高工作效率和成本效益。這種高通量蛋白篩選方法為新藥研發(fā)、酶工程和材料科學(xué)等領(lǐng)域提供了高效的篩選平臺,加速了藥物和生物材料的研發(fā)進(jìn)程。

由機(jī)器學(xué)習(xí)算法優(yōu)化CFPS系統(tǒng)的第一個例子是與高通量實驗耦合的機(jī)器人工作站。這種方法對應(yīng)于實驗的進(jìn)化設(shè)計(Evo-DOE),可基于人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)(ANN)的機(jī)器學(xué)習(xí)算法,預(yù)測下一輪實驗以改善適應(yīng)性功能。通過這種方法,證明了熒光報告蛋白的產(chǎn)量提高和能量緩沖液中重要成分之間的協(xié)同作用。


2.難表達(dá)蛋白的合成


在傳統(tǒng)細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中某些蛋白質(zhì)難以高效表達(dá),例如膜蛋白以及具有細(xì)胞毒性或難以正確折疊的蛋白質(zhì)。CFPS技術(shù)可以通過消除細(xì)胞內(nèi)的復(fù)雜調(diào)控和蛋白質(zhì)折疊問題,為難表達(dá)蛋白的合成提供新的選擇。通過優(yōu)化反應(yīng)條件,可以顯著提高這些蛋白質(zhì)的表達(dá)效率。


3.酶的定向改造


酶的定向改造是合成生物學(xué)領(lǐng)域的重要研究內(nèi)容之一。CFPS技術(shù)可以通過基因工程手段引入目標(biāo)基因,對酶的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行調(diào)整,從而獲得具有特定催化活性和穩(wěn)定性的新型酶。這為工業(yè)生產(chǎn)中的酶催化過程提供了更多可能性,推動了酶工程的進(jìn)步。


未來展望


隨著合成生物學(xué)和CFPS技術(shù)的不斷發(fā)展,其應(yīng)用前景將越來越廣闊??梢灶A(yù)見,未來,CFPS系統(tǒng)將變得更加高效、穩(wěn)定和可控,這將為蛋白質(zhì)的合成和定制提供更多可能性。同時,該技術(shù)還將與人工智能、大數(shù)據(jù)等前沿技術(shù)深度融合,進(jìn)一步推動生物醫(yī)藥、材料科學(xué)等領(lǐng)域的創(chuàng)新發(fā)展。

綜上所述,CFPS技術(shù)作為合成生物學(xué)領(lǐng)域的一項重要技術(shù),正在逐步改變蛋白質(zhì)研究的面貌。相信在不久的將來,這一技術(shù)將帶來更多突破和創(chuàng)新,為人類社會的發(fā)展注入新的動力。




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