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天津睿創(chuàng)生物科技有限公司
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睿創(chuàng)生物植物樣本處理方法

時間:2023/9/16閱讀:898
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植物組織樣本ELISA檢測處理方法

植物樣本處理方法

一、組織勻漿的制備: 

1、取組織塊(0.1g~0.5g)最少可到5~10mg在冰冷的PBS中漂洗,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入5ml的勻漿管中。 

2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。 

3、勻漿的方式:手工勻漿,機器勻漿。 

① 手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉(zhuǎn)動研磨數(shù)十次(6~8分鐘),充分研碎,制成10%的勻漿液。 

② 機器勻漿:用組織搗碎機10000~15000 轉(zhuǎn)/分 上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內(nèi)切式組織勻漿機制備(勻漿時間10秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次,在冰水中進行,可適當(dāng)延長勻漿時間),鏡檢觀察:

4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機3000轉(zhuǎn)/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進行測定.

二、勻漿介質(zhì):

 一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸鹽緩沖液(PBS),客戶可根據(jù)樣本及測定指標(biāo)的情況自行設(shè)定濃度,目的是保持樣本的等滲環(huán)境。

三、樣本保存:         

植物組織樣本暫時不測定,可立即低溫凍存,溫度越低越好,中間如不-反-復(fù)凍融,-20℃以下可保 存三個月,-70℃以下可保存六個月

微信圖片_20230916004405.png



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