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一文读懂凝胶色谱仪的使用流程
阅读：1027 发布时间：2023-4-24
凝胶色谱仪是一种常用的分离和纯化生物大分子的工具，通常用于分离蛋白质、核酸和多糖等大分子化合物。下面是凝胶色谱仪的使用流程：
1.制备样品
首先需要准备待检测的样品，并将其适当稀释至所需浓度。
2.选择适当的树脂柱
不同的树脂柱对应着不同的分子大小范围，因此需要根据待检测样品的大小选择适当的树脂柱。例如，对于较小的蛋白质可以选择分子量截止为10 kDa的Sephadex G-25柱。
3.装载样品
将已经稀释好的待测样品缓慢注入到树脂柱中，注意不能超过柱容积，避免压力过大。
4.收集洗脱液
根据实验需要，选择合适的洗脱液进行洗脱。通常情况下，可以利用PBS或者甘氨酸盐缓冲溶液进行洗脱，然后通过紫外吸收法或其他检测手段监测洗脱出来的目标分子。
5.数据分析
根据实验的结果进行数据分析，如计算目标分子在样品中的浓度或者分子量等。
6.清洗和保存
实验后需要对凝胶色谱仪进行清洗，以避免污染。清洗方法可以根据不同的树脂柱和洗脱液选择不同的清洗液。最后将凝胶色谱仪放置在干燥、阴凉处保存，以便下次使用。