人 CD34+ 細胞陰性分選試劑盒
MCE 國際站：Human CD34+ Cells Negative Selection Kit
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件：4℃，2 年磁珠禁止凍結(jié)
簡介：MCE 人 CD34+ 細胞陰性分選試劑盒通過可以從人臍帶血單個核細胞 (CBMC) 或外周血單個核細胞 (PBMC) 中快速富集 CD34+ 細胞。
概述：MCE 人 CD34+ 細胞陰性分選試劑盒通過可以從人臍帶血單個核細胞 (CBMC) 或外周血單個核細胞 (PBMC) 中快速富集 CD34+ 細胞。原理為生物素 (biotin) 標記的單克隆抗體對非目標細胞（非 CD34+ 細胞）進行標記，再通過鏈霉親和素 (streptavidin) 標記的磁珠對非目標細胞進行去除，從而實現(xiàn)人 CD34+ 細胞分選的目的。MCE 人 CD34+ 細胞陰性分選試劑盒操作簡單便攜，各成分對細胞均無毒性，可實現(xiàn)高純度細胞分離，分離的細胞可用于下游應用，例如流式細胞術(shù)、細胞培養(yǎng)、Western blot 分析、免疫沉淀 (IP)、報告基因檢測或 DNA/RNA 提取等。MCE 人 CD34+ 細胞陰性分選試劑盒具有如下優(yōu)點：簡單快速：30 min 即完成 CD34+ 細胞富集；無需分離柱：使用磁性分離器即可實現(xiàn)目的細胞的快速分離；富集效率高：一步富集可達到 10 倍濃縮，兩步富集達到 30 倍濃縮。
描述：
MCE 人 CD34+ 細胞負選試劑盒用于從人臍帶血單核細胞 (CBMC) 或人外周血單核細胞 (PBMC) 中分離 CD34+ 細胞。其原理是利用生物素標記的單克隆抗體標記非靶細胞（非 CD34+ 細胞），然后用鏈霉親和素標記的磁珠去除。該流程可有效分選人CD34+細胞。
MCE人CD34+細胞負選試劑盒的特點
高效：僅需30分鐘即可完成CD34+細胞的富集；
無需分離柱：使用磁分離器即可快速分離細胞，無需使用分離柱；
富集效率高：該流程一步富集可達到10倍濃度，兩步富集可達到30倍濃度。
操作說明：1. 制備人臍帶血單個核細胞 (CBMC) 或人外周血單核細胞 (PBMC) 懸液：通過 Ficoll 密度梯度離心法從人臍帶血或人外周血中分離并收集單個核細胞，PBS 洗滌細胞并離心。將 CBMC 或 PBMC 重懸于分選緩沖液中，調(diào)整細胞密度為 1×108 cells/mL。2. 取 100 μL 細胞懸液 (1 × 107 個細胞）加入無菌流式管底部，再加入 2 μL Biotin-Antibody Mix，混勻后 4°C 孵育 10 min。注：a. 細胞懸液直接加入流式管底部，避免沿流式管管壁加入。b. 根據(jù)所使用磁性分離器不同也可使用離心管進行細胞分選。c. 如果分選更多細胞，可按比例增加 Biotin-Antibody Mix 的用量。3. 磁珠準備：充分重懸 Streptavidin Magnetic Beads，取 20 μL 至 1.5 mL EP管中，加入 1 mL 分選緩沖液，10,000 × g 離心 1 min，棄上清。重復洗滌磁珠 1 - 2 次，加 20 μL分選緩沖液重懸磁珠。注：磁珠重懸分選緩沖液的用量與初始吸取磁珠體積需一致。4. 細胞-抗體孵育完成后，在流式管中加入 20 μL 清洗過的磁珠，混勻后 4°C 孵育 10 min。注：如果分選更多細胞，可按比例增加磁珠用量。如分選 5 × 107個細胞，在 500 μL 細胞懸液中加入 10 μL Biotin-Antibody Mix 和 100 μL 磁珠。如果分選少于 1 × 107 個細胞，則將細胞懸液體積補至 100 μL，加入 2 μL Biotin-Antibody Mix和 20 μL 磁珠。5. 孵育完成后，在流式管中加入 2.5 mL 分選緩沖液，用移液器輕柔吹吸混勻（避免劇烈振蕩或者上下顛倒混勻）。6. 將含有細胞的分選流式管置于磁性分離器上，磁性分離 5 min。7. 將細胞懸液轉(zhuǎn)移至干凈的無菌離心管中（轉(zhuǎn)移過程中流式管不可脫離磁性分離器），此細胞懸液中即包含富集的人 CD34+ 細胞，300 × g 離心 5 min。離心后棄上清，收集細胞。注：轉(zhuǎn)移過程中避免槍頭接觸磁珠，也可通過傾倒法收集細胞懸液。8. 根據(jù)實驗需要洗滌細胞，將細胞重懸于所需緩沖液或培養(yǎng)基中，即可用于后續(xù)分子生物學或細胞生物學實驗。
注意事項：1. Biotin-Antibody Mix 使用和保存過程中均應避免反復凍融、高速離心等操作。2. 建議選用低吸附移液器吸頭和離心管等耗材，避免因吸附造成磁珠和抗體的損耗。3. 磁珠在使用和保存過程中應避免高速離心、干燥或凍存；磁珠禁止長時間置于磁場，否則會引起磁珠聚團結(jié)塊，降低其結(jié)合活性。4. 從磁珠保存管中吸取磁珠前應充分振蕩混勻，操作過程中動作應輕柔，并避免產(chǎn)生氣泡。5. 本品需要與磁性分離器配套使用。6. 實驗操作過程需輕柔，避免對細胞造成機械損傷。7. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。8. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
銷售產(chǎn)品：PKUMDL-WQ-2201 | Ponatinib | BD-2, Human | Apamin | Polyphyllin VI | Sacubitril/Valsartan | Biotin-Vitamin B12 | OSU-T315 | Lucitanib | Ozanimod
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