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北京百泰派克生物科技有限公司
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基于iTRAQ的肽組學(xué)技術(shù)在炎癥研究中的

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基于iTRAQ的肽組學(xué)技術(shù)在炎癥研究中的應(yīng)用檢測技術(shù)服務(wù): iTRAQ同位素標(biāo)記技術(shù),可對樣本中的肽段 N 端與賴氨酸側(cè)鏈進行共價標(biāo)記,通過 4-plex 或 8-plex 多重標(biāo)記,實現(xiàn)多樣品同時定量。在質(zhì)譜二級圖譜(MS/MS)中,這些同質(zhì)異構(gòu)的標(biāo)簽裂解產(chǎn)生特征 reporter 離子,可用于jīngquè比較不同處理組的肽豐度。基于 iTRAQ 技術(shù)的肽組學(xué)在炎癥研究中應(yīng)用廣泛,涵蓋機制探索

基于iTRAQ的肽組學(xué)技術(shù)在炎癥研究中的應(yīng)用檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

iTRAQ同位素標(biāo)記技術(shù),可對樣本中的肽段 N 端與賴氨酸側(cè)鏈進行共價標(biāo)記,通過 4-plex 或 8-plex 多重標(biāo)記,實現(xiàn)多樣品同時定量。在質(zhì)譜二級圖譜(MS/MS)中,這些同質(zhì)異構(gòu)的標(biāo)簽裂解產(chǎn)生特征 reporter 離子,可用于jīngquè比較不同處理組的肽豐度?;?iTRAQ 技術(shù)的肽組學(xué)在炎癥研究中應(yīng)用廣泛,涵蓋機制探索、藥物反應(yīng)監(jiān)測與生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn),結(jié)合 PRM/ELISA 可實現(xiàn)科研與臨床的有效對接。


一、基于iTRAQ的肽組學(xué)技術(shù)為何適用于炎癥研究?

1、高通量比較能力:多樣本可在單次 LC-MS/MS 中同時分析,減少實驗偏差;

2、靈敏度與定量重現(xiàn)性高:相比標(biāo)簽前方法,iTRAQ 可同時兼具定性與半定量能力;

3、對炎癥標(biāo)志物探測高效:炎癥反應(yīng)中,細胞因子、補體、炎癥相關(guān)酶和受體等成分動態(tài)變化顯著,iTRAQ 可捕捉這些低豐度變化。


二、基于iTRAQ的肽組學(xué)技術(shù)在炎癥研究中的應(yīng)用

炎癥作為機體對感染、損傷或免疫刺激的高度復(fù)雜反應(yīng)過程,涉及大量可溶性因子(如細胞因子、趨化因子、補體蛋白)、受體和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的動態(tài)調(diào)控。傳統(tǒng)手段難以全面捕捉這些多維動態(tài)變化,而 iTRAQ 技術(shù)結(jié)合高分辨質(zhì)譜,為炎癥過程的系統(tǒng)性研究提供了強有力的技術(shù)支持。


1、揭示炎癥介質(zhì)的表達變化

通過對不同處理組肽段進行等摩爾標(biāo)記,在一次 LC-MS/MS 分析中實現(xiàn)多樣本平行定量,大幅提升了通量和比較效率。在炎癥研究中,該技術(shù)可廣泛應(yīng)用于分析以下炎癥相關(guān)因子:基于iTRAQ的肽組學(xué)技術(shù)

(1)急性期蛋白(如 C-反應(yīng)蛋白、血清淀粉樣蛋白等):其表達動態(tài)變化可被jīngquè量化,用于判斷炎癥程度。

(2)細胞因子調(diào)控蛋白:包括IL-1/6調(diào)節(jié)因子、NF-κB信號調(diào)控因子、STAT相關(guān)通路蛋白等,可揭示免疫信號轉(zhuǎn)導(dǎo)異常機制。

(3)細胞凋亡與自噬相關(guān)因子:炎癥狀態(tài)下細胞命運變化的重要調(diào)節(jié)蛋白(如 caspase、Beclin-1)也可通過 iTRAQ 分析其豐度變化。


2、炎癥通路富集與網(wǎng)絡(luò)建模

通過 iTRAQ 數(shù)據(jù)結(jié)合生物信息學(xué)分析,可識別在炎癥狀態(tài)下顯著上調(diào)或下調(diào)的多肽,并進一步進行功能注釋與通路富集(如 KEGG/GO 分析):

(1)識別激活通路:如 TNF-α/NF-κB、JAK/STAT、MAPK、NLRP3 炎癥小體等關(guān)鍵炎癥反應(yīng)通路。

(2)調(diào)控模塊重構(gòu):通過蛋白互作網(wǎng)絡(luò)(PPI)分析構(gòu)建炎癥調(diào)控網(wǎng)絡(luò),挖掘關(guān)鍵 hub 蛋白。

(3)靶點預(yù)篩:依據(jù)表達趨勢與網(wǎng)絡(luò)中心度,鎖定潛在治療干預(yù)靶點。


3、疾病狀態(tài)分型與分期

iTRAQ 肽組學(xué)還可用于炎癥性疾病的分型研究,例如:

(1)輕度與重度炎癥對比:通過定量差異分析,找出病程早期與進展期關(guān)鍵表達變化分子;

(2)治療響應(yīng)預(yù)測:基于 iTRAQ 數(shù)據(jù)構(gòu)建生物標(biāo)志物組合,預(yù)測個體對抗炎藥物、免疫抑制劑等療效;

(3)慢性與急性炎癥鑒別:識別特異分子模式(molecular signature),用于疾病類型分類或分期參考。


4、聯(lián)合多組學(xué)揭示炎癥網(wǎng)絡(luò)

在當(dāng)前精密醫(yī)學(xué)趨勢下,iTRAQ 肽組學(xué)常與其他組學(xué)數(shù)據(jù)(如轉(zhuǎn)錄組、代謝組、磷酸化組等)聯(lián)合分析:

(1)蛋白–mRNA 協(xié)同表達分析:判定蛋白豐度變化是否由轉(zhuǎn)錄水平驅(qū)動,篩選轉(zhuǎn)錄后調(diào)控目標(biāo);

(2)蛋白–代謝通路聯(lián)動:揭示炎癥狀態(tài)下的能量代謝重編程(如乳酸代謝、脂肪酸氧化);

(3)與表觀修飾組協(xié)同:結(jié)合乙酰化/磷酸化組學(xué),闡明炎癥信號傳導(dǎo)蛋白的修飾調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。


5、炎癥標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)與轉(zhuǎn)化應(yīng)用

通過 iTRAQ 篩選出的差異表達多肽,可進一步通過靶向質(zhì)譜(如 PRM/MRM)或免疫學(xué)手段(如 ELISA)進行驗證,推動以下轉(zhuǎn)化應(yīng)用:

(1)炎癥診斷標(biāo)志物開發(fā):挖掘可用于血液、尿液等樣本中檢測的非侵入性炎癥生物標(biāo)志物;

(2)個體化治療靶點發(fā)現(xiàn):識別疾病亞群的特異性調(diào)控因子,指導(dǎo)靶向治療;

(3)藥效學(xué)評價指標(biāo)建立:作為藥物作用機制確認(rèn)與療效監(jiān)測的可靠定量指標(biāo)。


三、基于iTRAQ的肽組學(xué)技術(shù)實驗流程詳解

1、樣本處理:提取血清、組織或細胞裂解液。

2、蛋白酶解:使用yídànbáiméi消化,生成可標(biāo)記肽段。

3、iTRAQ 標(biāo)記:分別將不同處理組肽段用各通道標(biāo)簽標(biāo)記,如 113–118。

4、樣本混合與預(yù)分離:混樣后通過 HILIC 或 SCX 分級,減少樣本復(fù)雜度。

5、LC-MS/MS 檢測:選用高分辨 Orbitrap 聯(lián)盟 MS 進行多輪數(shù)據(jù)收集。

6、數(shù)據(jù)分析:利用 Mascot、MaxQuant 等平臺進行賴氨酸肽識別與 reporter 離子峰定量。

7、差異蛋白篩選:選取 fold change ≥1.2 或 ≤0.83,結(jié)合 P 值和 FDR 校正。

8、通路富集分析:應(yīng)用 GO 與 KEGG 注釋解析炎癥相關(guān)通路。

9、靶向驗證:使用 PRM 或 ELISA 對關(guān)鍵炎癥蛋白進行驗證與二次鑒定。


百泰派克生物科技助力炎癥研究

百泰派克生物科技擁有完善的 iTRAQ 標(biāo)記與 LC-MS/MS 平臺能力:高通量方案,適應(yīng)多樣本對比;豐富數(shù)據(jù)處理與生信分析經(jīng)驗,提供通路富集與靶點挖掘報告;提供驗證性 PRM/ELISA 服務(wù),支撐臨床轉(zhuǎn)化;完整 QC 流程,符合 GLP/GCLP 標(biāo)準(zhǔn),確保臨床級數(shù)據(jù)質(zhì)量。

基于iTRAQ的肽組學(xué)技術(shù)在炎癥研究中應(yīng)用廣泛,涵蓋機制探索、藥物反應(yīng)監(jiān)測與生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn),結(jié)合 PRM/ELISA 可實現(xiàn)科研與臨床的有效對接。百泰派克生物科技憑借成熟平臺和zhuānyè團隊,可為客戶提供 iTRAQ 全流程解決方案,助力精密炎癥分析、標(biāo)志物開發(fā)與診斷轉(zhuǎn)化。如果您有炎癥相關(guān)研究需求,歡迎聯(lián)系我們,共同推動炎癥科研與臨床應(yīng)用創(chuàng)新。


百泰派克生物科技特色項目


一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù),包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù),對蛋白序列進行分析。


※服務(wù)優(yōu)勢:

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。



二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù),助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。


※服務(wù)優(yōu)勢:

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。



三、單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進行單細胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,采用金屬元素標(biāo)記物(通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體)標(biāo)記細胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質(zhì)量譜,zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細胞表面和內(nèi)部的信號分子表達量。


※服務(wù)優(yōu)勢:

1.技術(shù)*,*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標(biāo)同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大,成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右,而流式質(zhì)譜技術(shù)一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現(xiàn)了數(shù)量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾;

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。



四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進行免疫肽組學(xué)分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標(biāo)。



五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù),MALDI TOF,高效色譜分離技術(shù),提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù),幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。



百泰派克生物科技七大檢測平臺

基于iTRAQ的肽組學(xué)技術(shù)在炎癥研究中的




百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則,通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證,建立了完備的質(zhì)量體系,數(shù)據(jù)冷熱/異地備份,設(shè)備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù),支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系,zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù);

2.獲國家CNAS實驗室認(rèn)可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù);

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等;

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,滿足您一站式服務(wù)需求;

5.服務(wù)3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!



基于iTRAQ的肽組學(xué)技術(shù)在炎癥研究中的應(yīng)用檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

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