雜交瘤測(cè)序檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

雜交瘤測(cè)序是對(duì)通過(guò)雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生的細(xì)胞進(jìn)行基因測(cè)序的過(guò)程，用于研究雜交瘤細(xì)胞的基因組信息。雜交瘤細(xì)胞是在實(shí)驗(yàn)室中通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)，將具備特定抗體產(chǎn)生能力的B細(xì)胞與不朽化的骨髓瘤細(xì)胞融合而成的細(xì)胞。通過(guò)這種方法，研究人員能夠創(chuàng)建出既具有抗體分泌能力，又可以無(wú)限增殖的細(xì)胞系。雜交瘤技術(shù)用于制備單克隆抗體，將能產(chǎn)生抗體的 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，形成的雜交瘤細(xì)胞既具有 B 淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的能力，又具有骨髓瘤細(xì)胞在體外無(wú)限增殖的特性。雜交瘤測(cè)序就是為了深入分析這些細(xì)胞的基因組，為科學(xué)家們提供更加詳盡的遺傳信息。在單克隆抗體藥物的研發(fā)中，雜交瘤測(cè)序是bìbùkěshǎo的環(huán)節(jié)。通過(guò)測(cè)序確定的抗體序列可以用于優(yōu)化抗體的親和力、穩(wěn)定性和藥效等性能，從而開(kāi)發(fā)出更有效的治療藥物。例如在癌癥治療中使用的單克隆抗體藥物，通過(guò)雜交瘤測(cè)序不斷改進(jìn)抗體的靶向性和治療效果。雜交瘤測(cè)序的作用不可低估。雜交瘤測(cè)序可以幫助研究人員了解雜交瘤細(xì)胞的基因組結(jié)構(gòu)，揭示影響抗體產(chǎn)生的基因調(diào)控機(jī)制，并尋找可能導(dǎo)致雜交瘤不穩(wěn)定的遺傳因素。此外，通過(guò)雜交瘤測(cè)序，科學(xué)家可以識(shí)別出抗體基因的dútè序列特征，為優(yōu)化抗體生產(chǎn)提供指導(dǎo)。

一、測(cè)序流程

1、DNA 提取

從雜交瘤細(xì)胞中提取基因組 DNA 或者 mRNA。如果提取 mRNA，還需要通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄酶將其反轉(zhuǎn)錄為 cDNA。mRNA 提取的優(yōu)勢(shì)在于可以直接獲取編碼抗體的基因信息，因?yàn)樗コ藘?nèi)含子等非編碼序列，更方便后續(xù)的測(cè)序分析。

2、引物設(shè)計(jì)

根據(jù)抗體基因的已知序列特征設(shè)計(jì)引物。對(duì)于抗體的重鏈和輕鏈可變區(qū)，通常有保守的序列框架可以作為引物設(shè)計(jì)的靶點(diǎn)。引物的質(zhì)量直接影響測(cè)序的準(zhǔn)確性和完整性。

3、PCR 擴(kuò)增

使用設(shè)計(jì)好的引物對(duì)目標(biāo)抗體基因片段進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增。這一步可以增加目標(biāo)基因片段的數(shù)量，使其達(dá)到可以進(jìn)行測(cè)序分析的量。PCR 過(guò)程中需要嚴(yán)格控制反應(yīng)條件，如溫度、時(shí)間和酶的活性等，以確保擴(kuò)增的特異性和效率。

4、測(cè)序技術(shù)選擇

（1）Sanger 測(cè)序：具有測(cè)序長(zhǎng)度長(zhǎng)、準(zhǔn)確性高的優(yōu)點(diǎn)，適合對(duì)單個(gè)或少數(shù)幾個(gè)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體基因進(jìn)行測(cè)序。但是其通量較低，對(duì)于大規(guī)模的測(cè)序項(xiàng)目效率不高。

（2）二代測(cè)序（NGS）：如 Illumina 測(cè)序技術(shù)，可以同時(shí)對(duì)多個(gè)樣本或者大量的 DNA 片段進(jìn)行測(cè)序，能夠高通量地獲取雜交瘤細(xì)胞的抗體基因序列信息。不過(guò)其測(cè)序讀長(zhǎng)相對(duì)較短，在數(shù)據(jù)分析時(shí)可能需要更多的拼接等處理步驟。

5、數(shù)據(jù)分析

對(duì)測(cè)序得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，包括序列拼接、比對(duì)和注釋等。通過(guò)與已知的抗體基因數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，可以確定所測(cè)抗體基因的類(lèi)型、家族以及其dútè的可變區(qū)序列特征。還可以分析序列的突變情況、潛在的糖基化位點(diǎn)等影響抗體功能的因素。

二、雜交瘤測(cè)序的目的

1、抗體基因鑒定

確定所產(chǎn)生抗體的基因序列。通過(guò)測(cè)序，可以明確抗體的重鏈和輕鏈的可變區(qū)序列，這些區(qū)域決定了抗體的抗原結(jié)合特異性。

2、質(zhì)量控制

在單克隆抗體的研發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程中，對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行測(cè)序可以保證抗體的一致性和穩(wěn)定性。比如在不同批次的抗體生產(chǎn)中，通過(guò)比對(duì)測(cè)序結(jié)果，確保產(chǎn)生的抗體在基因水平上沒(méi)有發(fā)生變化。

3、新抗體發(fā)現(xiàn)

通過(guò)對(duì)雜交瘤細(xì)胞的測(cè)序，有可能發(fā)現(xiàn)具有新的抗原結(jié)合特性的抗體，為藥物研發(fā)、疾病診斷等領(lǐng)域提供新的工具。

雜交瘤測(cè)序的一大優(yōu)勢(shì)是其高靈敏度和高分辨率。相比于傳統(tǒng)的基因分析方法，雜交瘤測(cè)序能夠jīngquè定位基因組中的突變位點(diǎn)，識(shí)別復(fù)雜的基因重排和拷貝數(shù)變異。百泰派克生物科技一直專(zhuān)注于雜交瘤測(cè)序分析服務(wù)，我們擁有經(jīng)驗(yàn)豐富的科研團(tuán)隊(duì)，能夠?yàn)榭蛻?hù)提供從樣品制備、雜交瘤測(cè)序分析到數(shù)據(jù)處理的一站式服務(wù)。我們提供的雜交瘤測(cè)序服務(wù)，依托優(yōu)良的測(cè)序平臺(tái)和jīngzhàn的生物信息分析能力，能夠?yàn)榭蛻?hù)提供全面jīngzhǔn的基因組解析。如您對(duì)雜交瘤測(cè)序有任何需求或疑問(wèn)，歡迎隨時(shí)與我們聯(lián)系，我們的專(zhuān)家團(tuán)隊(duì)將竭誠(chéng)為您服務(wù)。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專(zhuān)有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶(hù)提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶(hù)提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿(mǎn)足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶(hù)的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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