遠(yuǎn)紫外與近紫外CD光譜在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究中的區(qū)別與應(yīng)用檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

圓二色性光譜（Circular Dichroism, CD）是一種敏感而非破壞性的光譜技術(shù)，廣泛應(yīng)用于dànbáizhì結(jié)構(gòu)研究。依據(jù)測(cè)量波長(zhǎng)的不同，CD光譜可分為遠(yuǎn)紫外（Far-UV, 190–250 nm）與近紫外（Near-UV, 250–320 nm）兩個(gè)波段，兩者在探測(cè)dànbáizhì不同層級(jí)結(jié)構(gòu)方面具有各自dútè的優(yōu)勢(shì)。本文將系統(tǒng)闡述這兩種CD技術(shù)的主要區(qū)別及其在dànbáizhì結(jié)構(gòu)研究中的典型應(yīng)用場(chǎng)景。

一、遠(yuǎn)紫外CD：揭示dànbáizhì的二級(jí)結(jié)構(gòu)特征

遠(yuǎn)紫外CD光譜主要反映肽鍵對(duì)圓偏振光的差異吸收，因而能夠有效評(píng)估dànbáizhì的二級(jí)結(jié)構(gòu)組成，包括α-螺旋、β-折疊和無(wú)規(guī)卷曲等。不同二級(jí)結(jié)構(gòu)在遠(yuǎn)紫外波段具有特征性吸收峰，使得研究人員能夠通過CD譜圖初步判斷dànbáizhì的構(gòu)象狀態(tài)及其變化趨勢(shì)。

※ 遠(yuǎn)紫外CD常用于以下場(chǎng)景：

• dànbáizhì折疊與解折疊研究

• 穩(wěn)定性評(píng)估（如熱熔解溫度Tm測(cè)定）

• 緩沖條件、pH、離子強(qiáng)度對(duì)構(gòu)象影響的分析

由于水和常規(guī)緩沖液在190–200 nm區(qū)間具有較強(qiáng)吸收，實(shí)驗(yàn)通常使用低濃度樣品、短光程比色皿，并優(yōu)化緩沖體系以提高譜圖質(zhì)量。

二、近紫外CD：探測(cè)dànbáizhì三級(jí)結(jié)構(gòu)環(huán)境

近紫外CD光譜主要來自芳香族殘基（如苯bǐngānsuān、làoānsuān、sèānsuān）及二硫鍵的構(gòu)象對(duì)稱性變化，因此可反映dànbáizhì三級(jí)結(jié)構(gòu)中側(cè)鏈環(huán)境的有序程度與構(gòu)象完整性。當(dāng)dànbáizhì發(fā)生局部折疊、構(gòu)象調(diào)整或配體結(jié)合時(shí)，這一波段的譜圖往往發(fā)生可觀變化。

※ 近紫外CD在以下研究中具有重要價(jià)值：

• dànbáizhì構(gòu)象完整性評(píng)價(jià)

• 配體結(jié)合前后的構(gòu)象響應(yīng)監(jiān)測(cè)

• 不同表達(dá)體系或純化工藝下的蛋白結(jié)構(gòu)一致性對(duì)比

需要注意的是，近紫外CD信號(hào)相對(duì)較弱，對(duì)樣品濃度和純度要求更高，常需使用高濃度蛋白（一般在1 mg/mL以上）和較長(zhǎng)光程（如1 cm）的比色皿。

三、二者互補(bǔ)性與協(xié)同價(jià)值

遠(yuǎn)紫外與近紫外CD并非彼此替代，而是在dànbáizhì結(jié)構(gòu)研究中形成了互補(bǔ)的技術(shù)體系：

通過同時(shí)采集遠(yuǎn)紫外與近紫外CD數(shù)據(jù)，可全面評(píng)估dànbáizhì在不同條件下的構(gòu)象行為，從全局折疊狀態(tài)到局部構(gòu)象細(xì)節(jié)，構(gòu)建完整的結(jié)構(gòu)動(dòng)態(tài)變化圖譜。

四、CD光譜技術(shù)在現(xiàn)代蛋白研究中的價(jià)值

隨著結(jié)構(gòu)生物學(xué)的不斷發(fā)展，CD光譜不僅作為常規(guī)結(jié)構(gòu)篩查工具廣泛使用，也逐步融入更復(fù)雜的研究體系，如：

• 蛋白-小分子互作篩選中的快速構(gòu)象響應(yīng)監(jiān)測(cè)

• dànbáizhì工程中突變體構(gòu)象改變的初步驗(yàn)證

• 多組分體系下構(gòu)象變化的高通量評(píng)估

此外，借助計(jì)算模擬、譜圖反卷積與機(jī)器學(xué)習(xí)算法，CD數(shù)據(jù)正逐步向定量化和結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)拓展，增強(qiáng)了其在高通量篩選與質(zhì)量控制流程中的實(shí)用性。

遠(yuǎn)紫外與近紫外CD光譜作為快速、靈敏的dànbáizhì結(jié)構(gòu)檢測(cè)工具，在基礎(chǔ)研究與應(yīng)用開發(fā)中均展現(xiàn)出bùkětìdài的價(jià)值。通過合理設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，結(jié)合多波段數(shù)據(jù)解析，科研人員可在不依賴高分辨結(jié)構(gòu)的前提下，高效獲取dànbáizhì結(jié)構(gòu)狀態(tài)信息。百泰派克生物科技整合CD光譜、質(zhì)譜分析、熱穩(wěn)定性測(cè)試等多維技術(shù)，為科研人員提供系統(tǒng)的蛋白構(gòu)象解析方案。我們將持續(xù)以高質(zhì)量的技術(shù)服務(wù)，支持dànbáizhì科學(xué)研究的每一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，填補(bǔ)技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合*藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

遠(yuǎn)紫外與近紫外CD光譜在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究中的區(qū)別與應(yīng)用檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹