液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在定量蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì組學(xué)作為生命科學(xué)領(lǐng)域的重要分支，致力于全面解析細(xì)胞、組織或機(jī)體中dànbáizhì的表達(dá)、修飾與相互作用。定量dànbáizhì組學(xué)則進(jìn)一步推動(dòng)了生物醫(yī)學(xué)、藥物開(kāi)發(fā)及疾病機(jī)制研究的發(fā)展。其中，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（Liquid Chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS/MS）因其高靈敏度、高通量與廣譜覆蓋能力，已成為定量dànbáizhì組學(xué)研究的核心工具。

一、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)概述

1、液相色譜（LC）

液相色譜主要負(fù)責(zé)對(duì)復(fù)雜樣品中的肽段進(jìn)行分離。常用的反相液相色譜（RP-LC）以肽段的疏水性差異為依據(jù)，在C18色譜柱中實(shí)現(xiàn)高效分級(jí)，極大地減少了下游質(zhì)譜分析的樣品復(fù)雜度。

2、質(zhì)譜（MS/MS）

質(zhì)譜儀通過(guò)電噴霧電離（ESI）將肽段離子化，再通過(guò)串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）模式進(jìn)行定性與定量分析。一級(jí)質(zhì)譜（MS1）檢測(cè)肽段的質(zhì)荷比（m/z），二級(jí)質(zhì)譜（MS2）則對(duì)選定母離子進(jìn)行碎裂，生成特征子離子譜圖，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)肽段與dànbáizhì的鑒定。

3、聯(lián)用技術(shù)優(yōu)勢(shì)

LC與MS的聯(lián)用極大地提升了分析的分辨率和靈敏度，能夠覆蓋動(dòng)態(tài)范圍廣、豐度跨度大的dànbáizhì群體，實(shí)現(xiàn)從復(fù)雜生物樣本中高效、準(zhǔn)確地提取有價(jià)值信息。

二、LC-MS/MS在定量dànbáizhì組學(xué)中的應(yīng)用

1、標(biāo)記定量方法

（1）iTRAQ與TMT標(biāo)記

等量標(biāo)記方法如iTRAQ和TMT（Tandem Mass Tags）廣泛應(yīng)用于多樣本并行定量。這類方法通過(guò)同位素標(biāo)簽對(duì)肽段進(jìn)行化學(xué)標(biāo)記，在質(zhì)譜MS/MS級(jí)別實(shí)現(xiàn)相對(duì)定量，具有高通量、jīngquè度高的優(yōu)勢(shì)，特別適合大規(guī)模臨床樣本研究。

（2）SILAC標(biāo)記

穩(wěn)定同位素標(biāo)記細(xì)胞培養(yǎng)（SILAC）通過(guò)在細(xì)胞培養(yǎng)中引入輕重同位素氨基酸實(shí)現(xiàn)天然代謝標(biāo)記，避免樣品處理過(guò)程引入的偏差。SILAC特別適合細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化研究，如藥物刺激、信號(hào)通路調(diào)控等。

2、無(wú)標(biāo)記定量方法（Label-Free Quantification, LFQ）

LFQ方法基于肽段離子信號(hào)強(qiáng)度或譜圖計(jì)數(shù)進(jìn)行定量，適用于探索性研究或大規(guī)模篩選項(xiàng)目。近年來(lái)，結(jié)合高靈敏度質(zhì)譜平臺(tái)和優(yōu)良數(shù)據(jù)處理軟件（如MaxQuant、Spectronaut），LFQ已能實(shí)現(xiàn)數(shù)千種dànbáizhì的高精度定量，在腫瘤標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)、免疫研究中展現(xiàn)出jígāo價(jià)值。

3、DIA模式的興起

數(shù)據(jù)獨(dú)立采集（DIA）技術(shù)通過(guò)系統(tǒng)性、無(wú)偏倚地采集全部肽段信號(hào)，極大提高了數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性和準(zhǔn)確性。SWATH-MS、BoxCar DIA、PASEF-DIA等新興技術(shù)，使得DIA模式在復(fù)雜樣本如組織、血漿、外泌體蛋白組學(xué)中獲得廣泛應(yīng)用。

4、定量dànbáizhì組學(xué)在多組學(xué)整合中的角色

隨著多組學(xué)（Multi-Omics）研究的發(fā)展，將定量dànbáizhì組學(xué)數(shù)據(jù)與轉(zhuǎn)錄組、代謝組、表觀組學(xué)整合，成為解析復(fù)雜疾病機(jī)制的重要手段。LC-MS/MS生成的高質(zhì)量定量數(shù)據(jù)為通路分析、網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建和系統(tǒng)生物學(xué)研究提供了堅(jiān)實(shí)支撐。

三、技術(shù)進(jìn)展助力定量dànbáizhì組學(xué)發(fā)展

• 高分辨率質(zhì)譜儀提升了蛋白鑒定深度和定量準(zhǔn)確性。

• 納升級(jí)液相色譜（nanoLC）拓展了微量樣本（如單細(xì)胞）的定量能力。

• 高pH反相色譜分級(jí)與多維分離技術(shù)，顯著提高了dànbáizhì組覆蓋度。

• AI輔助譜圖預(yù)測(cè)與識(shí)別（如Prosit、DeepMass），進(jìn)一步提升了數(shù)據(jù)處理效率和準(zhǔn)確性。

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)正在不斷拓展定量dànbáizhì組學(xué)的應(yīng)用邊界。從基礎(chǔ)生物學(xué)研究到臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用，LC-MS/MS以其wúkěbǐnǐ的分離與檢測(cè)能力，為生命科學(xué)研究提供了強(qiáng)大動(dòng)力。百泰派克生物科技基于優(yōu)良的LC-MS/MS平臺(tái)，結(jié)合系統(tǒng)優(yōu)化的定量流程，為客戶提供高質(zhì)量的定量蛋白組分析服務(wù)。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上優(yōu)良的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)優(yōu)良，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問(wèn)題?？稍趩渭?xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過(guò)我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過(guò)CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在定量蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹