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蛋白相互作用是指兩個及以上的蛋白質分子結合形成蛋白質復合體的一個過程。一般情況下蛋白質很難單獨發(fā)揮作用,都是由多個蛋白質分子的相互協(xié)調共同實現復雜的細胞功能。因此專注于蛋白相互作用的研究更加利于探索疾病的發(fā)生發(fā)展、找尋特定的疾病預測治療方法,并且在新藥研發(fā)的研究方面提供新的思路。蛋白質互作分析的方法較多,百泰派克提供蛋白質互作分析服務,及后續(xù)基于液質聯用技術(LC-MS/MS)對IP、Co-IP樣品及GST融合蛋白Pull-down等純化樣本中的蛋白/蛋白混合物的質譜鑒定分析服務。詳情參見:
蛋白質相互作用質譜分析
免疫共沉淀法(CO-IP)結合質譜聯用的蛋白互作分析
GST融合蛋白Pull-down技術結合質譜聯用的蛋白互作分析
SILAC與免疫共沉淀結合質譜聯用的蛋白互作分析
免疫共沉淀法(CO-IP)利用抗原抗體之間的特異性來檢測蛋白質之間的生理性相互作用的一種方式。首先在實驗中為了zuì大限度的保留細胞中蛋白的相互作用,會使用非離子變性劑來裂解細胞。當細胞裂解時,細胞內的蛋白相互作用被保存下來,在其中加入相應的抗體,使抗體與細胞中的特異蛋白質結合,再加入蛋白A/G形成抗體蛋白復合物,進行離心、分離,使抗體蛋白復合物沉淀,棄去上清液,zuì后用質譜技術鑒定沉淀下來的蛋白質,進而證明兩者間的相互作用。僅適用于分析穩(wěn)定或者強烈的蛋白質間相互作用;通常用來鑒定某個目標蛋白質與另一個蛋白質之間相互作用或者被用來尋找與某個目標蛋白質存在相互作用的未知蛋白質。
百泰派克生物科技針對樣品蛋白的提取、表達和純化的優(yōu)化方案可確保獲得高質量的誘餌和獵物蛋白,為客戶提供優(yōu)質的Co-IP蛋白互作分析服務及對免疫共沉淀CO-IP獲取的蛋白進行蛋白質譜分析。
• 優(yōu)點:可分離得到天然狀態(tài)下相互作用的蛋白復合物; • 缺點:靈敏度較低;不能進行親和力低和瞬間的蛋白質相互作用分析檢測。
GST融合蛋白pull-down沉降技術,利用基因重組將帶有GST標簽的載體插入到目標蛋白A上,gǔguānggāntài包裹的磁珠與目標融合蛋白結合,加入細胞裂解液后,具有相互作用的蛋白被融合蛋白吸附,加入過量的gǔguānggāntài進行洗脫,zuì后用MS技術分析。這種方法主要是研究體外強烈或者穩(wěn)定的蛋白質間相互作用;可以鑒定兩種已知的感興趣蛋白質可能存在的直接相互作用;尋找可能與目標蛋白存在相互作用關系的未知蛋白。
作為技術依托型的科研技術服務公司,百泰派克生物科技在蛋白互作分析服務及基于質譜的互作蛋白質質譜鑒定分析方面擁有多年經驗。百泰派克提供基于GST pull-down蛋白互作分析服務,及Pull-down靶蛋白質譜鑒定服務。我們以嚴格的質量控制和較短的檢測周期為特色,百泰派克向客戶提供可定制的一站式服務,涵蓋您項目中從基因合成到數據報告的每個步驟。
• 優(yōu)點:可排除細胞內其他情況的干擾;可以直接檢測蛋白質之間是否有相互作用;方法簡單,操作方便。
• 缺點:在細胞外進行,不能準確的反應細胞內的蛋白質相互作用關系。
利用SILAC方法分別標記實驗組和對照組細胞后進行Co-IP實驗,依靠抗原與抗體之間的專一性反應分離得到免疫復合物;再通過LC-MS/MS來定性/定量檢測免疫復合物中的蛋白;當實驗組與對照組中某個蛋白質的含量達到統(tǒng)計學差異時,判定這個蛋白質與研究的蛋白具有相互作用,可極大降低蛋白質互作假陽性結果可能性。SILAC技術和Co-IP-MS技術結合可用于高通量定量分析在特定情況下蛋白的互作蛋白網。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質譜平臺,Orbitrap Fusion質譜平臺,Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供SILAC與免疫共沉淀質譜聯用的蛋白互作分析服務技術包裹(SILAC-based CoIP-MS),您只需要將您的實驗目的告訴我們并將您的細胞寄給我們,我們會負責項目后續(xù)所有事宜,包括細胞培養(yǎng)、細胞標記、蛋白提取、抗體IP、效率檢測、蛋白酶切、肽段分離、質譜分析、質譜原始數據分析、生物信息學分析。
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對蛋白質序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對蛋白質的氨基酸組成分析,N端測序,C端測序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白質N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質,提供基于從頭測序法的蛋白質從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優(yōu)勢:
1.采用目前世界上優(yōu)良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量蛋白質組學、靶向蛋白質組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種蛋白質組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白質組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫(yī)學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優(yōu)勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析,發(fā)現新的生物標記物;
2.體內體外多種蛋白質標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統(tǒng)準確。
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統(tǒng)進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優(yōu)勢:
1.技術優(yōu)良,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規(guī)蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發(fā)現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規(guī)模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從蛋白質、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質生物藥物分析服務,幫助生物醫(yī)藥生產商提高生物藥物品質。
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務;
3.業(yè)務范圍覆蓋蛋白質組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;
5.服務3000+企業(yè),10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優(yōu)質的生物質譜分析服務!
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