單克隆抗體從頭測序檢測技術服務詳情介紹

單克隆抗體分子在藥物研發(fā)、診斷試劑開發(fā)中扮演了關鍵的角色。抗體分子本身的一級結構，特別是其CDR區(qū)域的氨基酸序列是發(fā)揮其生物學功能的核心，對其完整序列準確快速的分析具有十分重要的意義。例如對市場上已有的抗體產品直接進行序列分析是開發(fā)抗體藥物，抗體診斷試劑和其它抗體產品的捷徑；許多商業(yè)可得的抗體對于藥物靶點有中和活性，通過單抗序列測定得到該抗體的一級序列，可以以此為基礎可進行抗體親和力提升和人源化來開發(fā)抗體藥物；在進行抗體仿制藥物研發(fā)過程中，原研藥本身準確的一級結構信息是進行抗體仿制藥研發(fā)的基礎和前提。
百泰派克公司基于先進的高分辨率質譜儀Obitrap Fusion Lumos，結合豐富的生物信息學分析經(jīng)驗，建立了全新一代抗體測序平臺，實現(xiàn)對抗體一級結構快速準確的分析。該平臺適用于不同亞型抗體（例如IgG和IgM）和不同類型抗體（熒光偶聯(lián)抗體，固定化抗體，不同物種的抗體）的序列分析。

單克隆抗體從頭測序服務流程

單克隆抗體從頭測序服務優(yōu)勢：

1. 單抗輕重鏈肽段全序列覆蓋
在進行抗體序列測定過程中百泰派克會選擇5種不同的蛋白酶進行酶切，利用不同酶切肽段之間的互補性實現(xiàn)抗體分子輕重鏈100%全序列的拼接。而對于抗體核心區(qū)域CDR序列在進行序列分析過程中要求至少被鑒定到10次，以此來充分保證測序結果的準確性（如下圖所示）。

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2. 先進的數(shù)據(jù)處理算法
百泰派克基于發(fā)表在Nature Biotechnology和專業(yè)的蛋白組學雜志JPR上的文獻，結合現(xiàn)有的專業(yè)進行抗體序列分析的軟件PEAKS Mass Spectrometry Software，開發(fā)了自己的質譜原始數(shù)據(jù)計算方法，采用寬進窄出的原則，在不遺漏任何有效數(shù)據(jù)信息的同時實現(xiàn)了抗體序列的準確鑒定。

3. 高精度和準確性
百泰派克在測序過程中會使用目前分辨率和高靈敏度Orbitrap Fusion Lumos質譜儀；與老一代的質譜儀（例如Obitrap Elite、Q Exactive等）相比，Lumos在提高了一級二級質譜掃描速度的同時保證肽段分子量的準確性；一級質譜掃描速度的提高，有助于同一個肽段可以更多次的被鑒定到，提高了結果的可信性；二級質譜掃描速度的提高可以更好的進行片段碎裂（如下圖所示），從而保證結果的準確性，并可以通過二級碎裂片段的特征峰實現(xiàn)Liangansuan和異Liangansuan的準確判定。

單克隆抗體從頭測序3

4. 可對多種亞型和不同類型的抗體進行測序
我們建立的技術平臺不受小基團（如FITC、Biotin、Alexa）的影響，雖然較大的蛋白基團會給測序帶來難度，但若提供較高濃度的蛋白仍可成功測序。

5. 嚴謹?shù)男蛄蓄A測和嚴格的序列驗證
我們對測序的結果會首先進行序列的預測，標明抗體的CDR區(qū)域（如下圖所示）；同時，我們還會以測定的序列建立新的數(shù)據(jù)庫，采用Sequence Confirmation的模式對采集到的質譜數(shù)據(jù)再次進行分析，只有wán quán匹配的結果我們才會提供給客戶。

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中/英文項目報告

在技術報告中，百泰派克生物科技會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告，報告包括：

1. 實驗步驟（中英文）
2. 相關的質譜參數(shù)（中英文）
3. 質譜圖片
4. 原始數(shù)據(jù)
5. 肽段序列信息
6. 抗體序列信息

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