【摘要】：转化生长因子β2（TGF-β2）是一种细胞外糖基化蛋白，属于转化生长因子β（TGF-β）超家族成员。它通过I型和II型受体（TGFβR1和TGFβR2）介导信号传导，在细胞迁移、增殖、分化、胚胎发育、免疫调节及组织修复等生理过程中发挥关键作用。TGF-β2的信号传导主要通过下游SMAD蛋白的磷酸化实现，调控目标基因表达。其生物学功能广泛，包括抑制免疫细胞过度活化、促进细胞外基质合成、参与胚胎发育中的器官形成和组织模式化，以及在伤口愈合中调节炎症反应和新生血管形成。

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牛转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA试剂盒组成

操作步骤：

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加稀释液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

技术小提示：

1）加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，避免产生气泡。加样时间宜控制再10分钟内。

2）可用洗板机洗板，每一步洗涤充分都是实验的根本。

3）根据实际显色情况酌情缩短或延长孵育时间，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度的时候即可终止。

4）终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。

5）实验完毕后将未使用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至保质期。

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