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实验室推荐人(α-GST)ELISA检测试剂盒操作步骤：

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加稀释液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

实验室推荐人(α-GST)ELISA检测试剂盒实验注意事项：

1） 为了避免交叉感染，配置不同浓度标准品，上样、加不同试剂都需要更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。

2） 混合或重溶蛋白溶液时，尽量避免起沫。

3） 每次孵育时，请使用正确的封板胶可保证结果的准确性。

4） 终止液上板书匈奴应同显色底物上板顺序一致；加入终止液后孔内颜色由蓝变黄；若孔内有绿色，则表明孔内液体未混匀请充分混合。

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