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廣州奧瑞達生物科技有限公司
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奧瑞達生物給您講解ELISA試驗檢測的質(zhì)量分析

時間:2024/4/9閱讀:1395
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ELISA方法現(xiàn)在已經(jīng)被廣泛的應用于各種抗原和抗體測定。拋開試劑盒本身質(zhì)量外,我們在實驗中也有很多因素都會影響試驗的正常結果。其中最常出現(xiàn)的問題是顯色淡,靈敏度偏低、重復性不佳、假陽性結果和假陰性結果,不管出現(xiàn)什么樣的結果都會直接影響我們的實驗結果。下面來分析ELISA實驗非正常檢測結果產(chǎn)生的常見原因,并分析其解決辦法,以提高檢測質(zhì)量。

1、方法學的影響

ELISA 測定模式包括以下幾種: 雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM 抗體捕捉法、競爭抑制法, 其中競爭抑制法因受操作時差所引起的競爭等因素的影響, 結果重復性較差, 質(zhì)量較難控制。

2、試劑因素

試劑的選擇 檢測的原理均基于抗原抗體反應。由于該反應過程受多種因素的影響, 如普遍存在基質(zhì)效應、交叉反應等, 因而檢測結果難以溯源, 不同方法、不同試劑之間甚至同一試劑不同批號間結果均缺乏可比性。試劑質(zhì)量在很大程度上決定了檢測的水平, 因此在引入新項目之前必須對試劑進行嚴格的評估。試劑的評估有以下幾個步驟: (1) 確定開展該項目的必要性; (2) 了解該項目現(xiàn)有的檢測方法和原理; (3) 在了解試劑的組成基礎上選擇多家試劑盒進行比較,判斷標準參考方法或參考物質(zhì), 其次為臨床的滿意度及機構的報告如各級室間質(zhì)量評價、CDC 報告等; (4) 定期對檢測結果進行追蹤反饋直至最終認可該試劑。

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