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流式細胞術一文Get

閱讀:496      發(fā)布時間:2025-1-16
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一、流式細胞術

流式細胞術(Flow Cytometry,FCM)從字面意義理解,Flow—Fluid、Cyto—Cell、Metry—Measurement,是一種對液流中排成單列的細胞或其它生物微粒(如微球,細菌,小型模式生物等)逐個進行快速定量分析和分選的技術。其特點是通過快速測定庫爾特電阻、熒光、光散射和光吸收來定量測定細胞DNA含量、細胞體積、蛋白質含量、酶活性、細胞膜受體和表面抗原等許多重要參數(shù)。根據(jù)這些參數(shù)將不同性質的細胞分開,以獲得供生物學和醫(yī)學研究用的純細胞群體。

1.流式細胞術的關鍵優(yōu)勢:

高通量:一次實驗能夠分析數(shù)千至數(shù)百萬個細胞,幾秒內完成大規(guī)模數(shù)據(jù)收集。

單細胞多參數(shù)分析:一次實驗可同時測量單個細胞的多個參數(shù),如細胞大小、顆粒性、表面標志物和內部復雜性。

數(shù)據(jù)精確度高:通過熒光信號與細胞大小等物理參數(shù)結合,提供精確的亞群分析。

2.核心應用

免疫表型分析(Immunophenotyping:通過熒光標記的抗體鑒定不同的免疫細胞亞群。

細胞周期分析:評估細胞群體的不同周期階段。

細胞凋亡檢測:通過標記凋亡相關分子檢測細胞凋亡情況。

細胞活力檢測:結合活細胞與死細胞染料,分析細胞活力狀態(tài)。

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二、流式細胞術原理

1. 特定波長的激光束直接照射到高壓驅動的液流內的細胞,產(chǎn)生的光信號被多個接收器所接收,包括激光束直線方向上接收到的散射光信號(前向角散射)和激光束垂直方向上接收到的光信號(散射光信號(側向角散射)和熒光信號)。液流中懸浮的直徑從0.2-150 μm的細胞或顆粒能夠使激光束發(fā)生散射,細胞上結合的熒光化合物被激光激發(fā)后能夠發(fā)射熒光。散射光信號和熒光信號被相應的接收器接收,根據(jù)接受到的信號的強弱從而反映每個細胞的物理學特征。

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2. 熒光的原理 是流式細胞術中的核心。熒光分子(稱為熒光團,fluorophore)通過吸收外部光源(如激光)產(chǎn)生激發(fā),隨后回到基態(tài)時發(fā)出熒光。這一發(fā)射光信號可被檢測,并用于標記不同的細胞組分,如細胞表面或內部抗原。

3. 熒光過程的三個階段:

激發(fā)(Excitation):熒光分子吸收激光能量,電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。

激發(fā)態(tài)壽命(Excited Lifetime):熒光分子處于激發(fā)態(tài)的時間極短,通常為納秒級。

發(fā)射(Emission):電子回到基態(tài)時釋放多余的能量,以較低能量的光子形式發(fā)射,波長比激發(fā)光更長。

4. 斯托克斯位移(Stokes Shift):

斯托克斯位移是指激發(fā)光的波長與發(fā)射光波長之間的差異,發(fā)射光總是比激發(fā)光的波長長、能量低。這個位移是區(qū)分不同熒光染料發(fā)射信號的基礎。利用這種位移可以有效避免激發(fā)光與發(fā)射光的混淆。

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5.熒光染料的選擇:

熒光染料是根據(jù)它們的激發(fā)波長和發(fā)射波長來選擇的。常見的熒光染料如Alexa Fluor系列、FITCPE等,它們有不同的光譜特性,適用于不同的激光器配置。(Alexa Fluor 488 的激發(fā)波長為488 nm,發(fā)射波長為530 nm


三、Biolegend抗體代理——天津益元利康生物科技有限公司,為您提供流式抗體等產(chǎn)品。歡迎咨詢?。。。?!

部分Biolegend產(chǎn)品列表:

品牌貨號商品名稱
Biolegend803002Purified anti-β- Amyloid, 1-16 Antibody (Previously Covance catalog# SIG-39320)
Biolegend139335Brilliant Violet 510™ anti-mouse CD64 (FcyRI)  
Biolegend107628APC/Cyanine7 anti-mousel-A/-E Antibody
Biolegend151210PE anti-mouse/human Ki-67 Antibody
Biolegend103205FITC anti-mouse/human CD45R/B220 Antibody
Biolegend130021APC anti-mouse Tim-4
Biolegend740150LEGENDplex™ Mouse Inflammation Panel (13-plex) with Filter Plate
Biolegend801202Purified anti- Tubulin β 3 (TUBB3)
Biolegend145513Brilliant Violet 605  anti-mouse CD185 (CXCR5)
Biolegend109110PE/Cyanine7 anti-mouse CD279 (PD-1) Antibody
Biolegend480172MojoSort™ Mouse CD146 (LSEC) Selection Kit
Biolegend480017MojoSort  Buffer (5X)


天津益元利康生物科技有限公司:

一、輻射五大服務方向:

 1.國內試劑耗材經(jīng)銷代理;

 2.國外試劑訂購(直訂,或境外代理);

 3.基因組測序(二代,二代+三代);

 4.基因分型(SNP檢測):低//中 高通量項目;

 5.生物樣本運輸(國內、);

二、多家代理品牌,涉及30多種較有名品牌,經(jīng)營代理500多個品牌:

Qiagen、Sigma、R&D、Epigentek、ThermoFisher、DNA Genotek、USA Scientific、MatreyaSage ScienceList Labs、Macrocyclics、Steraloids、NIBSC、mobio、immunodx、cellsystems、medicagoabcam、CST、Roche、Bethyl、sino Biological、clodrosome、adi BIO-WORLDTOKU-E、HYPHEN BioMed、moltox、ZeptoMetrix、International Humic、biocytex、Toxin Technology  、StreckElastin、biomax、Orflo Technologies、AccegenAdvbiomart、genlantis、R&D、Cygnus Technologies LLC、Enzyme ResearchBio/Data Corporation、Greer Lab 、Solarbio、bangslabs、bioline、musechemNovocastra stemrd、hyphen-biomed、polyplus、moltox exiqon、pentapharmverichemlabs、GenStarALZET、lucernatechnologies 、meridian、origene、zimmerpeacocktech、horizondiscovery、Reagents、megazyme、elisasystems………

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