DNA測序技術(shù)一直是分子生物學相關(guān)研究中常用的技術(shù)手段之一，從一定程度上推動了該領(lǐng)域的快速發(fā)展。每一代測序技術(shù)的更替都標志著生物學中基因芯片、數(shù)據(jù)分析、表面化學、生物工程等技術(shù)領(lǐng)域有了新的突破，使測序向著高通量、低成本、高安全性和商業(yè)化的方向發(fā)展。那么二代測序(NGS)的原理是什么？讓我們一起來看看吧！
第二代測序(NGS)又稱為高通量測序(High-throughputsequencing)，是基于PCR和基因芯片發(fā)展而來的DNA測序技術(shù)。二代測序引入了可逆終止末端，從而實現(xiàn)邊合成邊測序。二代測序在DNA復制過程中通過捕捉新添加的堿基所攜帶的特殊標記來確定DNA的序列。由于在二代測序中，單個DNA分子必須擴增成由相同DNA組成的基因簇，然后進行同步復制，來增強熒光信號強度從而讀出DNA序列；而隨著讀長增長，基因簇復制的協(xié)同性降低，導致堿基測序質(zhì)量下降，這嚴格限制了二代測序的讀長，因此，二代測序具有通量高、讀長短的特點。
NGS技術(shù)因其高效和低廉的單堿基測序成本為臨床應用提供了不可估量的前景優(yōu)勢，尤具相對傳統(tǒng)的Sanger測序法其每次產(chǎn)生的數(shù)據(jù)量幾乎是天文數(shù)字，加之信息科學的持續(xù)發(fā)展，使得對這樣的大數(shù)據(jù)進行有效的處理已成為現(xiàn)實。目前NGS技術(shù)已應用在分子診斷、遺傳分析、病原物生物等方面。
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