土壤有效硫试剂盒说明书
微量法100T/96S
注 意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
土壤硫对农林畜牧具有重要作用，环境中许多污染物都是含硫化合物，通过大气传输沉降到土壤中，对生态系统产生一定的影响，土壤中的硫可被植物吸收利用。
测定原理：
利用硫酸钡比浊法测定。
自备实验用品及仪器：
天平、常温离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、震荡仪。
试剂组成和配制：
酸性土壤提取液：液体105mL×1瓶，4℃保存。
碱性土壤提取液：液体105mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体0.5mL×1支，4℃保存。
试剂二：液体4mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体8mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体4mL×1瓶，4℃保存。
样本处理：
新鲜土样风干，过20目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为1：5的比例（建议称取约0.2g土样，加入1mL提取液），振荡提取1h，10000g ，25℃离心10min，取上清液待测。
测定操作表：
空白管 | 测定管 | |
样本（μL） | 40 | |
提取液（μL） | 40 | |
试剂一（μL） | 5 | 5 |
90℃开盖消煮5min，取出自然冷却 | ||
试剂二（μL） | 40 | 40 |
试剂三（μL） | 80 | 80 |
试剂四（μL） | 40 | 40 |
充分混匀，25℃震荡20min | ||
于微量石英比色皿/96孔板，蒸馏水调零，测定440nm处吸光值A，分别记为A空白管和A测定管，△A=A测定管-A空白管 | ||
计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.0104x + 0.0009，R2 = 0.9999
有效硫含量（mg/kg）=（△A-0.0009）÷ 0.0104÷（W÷V样总）
= 96.15×（△A-0.0009）÷W
V样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.0052x + 0.0009，R2 = 0.9999
有效硫含量（mg/kg）=（△A-0.0009）÷ 0.0052÷（W÷V样总）
=192.3×（△A-0.0009）÷W
V样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
注意事项：
1. 酸性和碱性土壤提取液不一样，提取前必须确认土壤的酸碱性，加入对应的提取液。
2. 90℃消煮必须开盖，使试剂一wan全散出。
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